产品名称:萤火虫荧光素酶的生物素酰化修饰 (Luciferase-Biotin)
一、定义与背景
定义:萤火虫荧光素酶的生物素酰化修饰是指通过特定的化学反应,将生物素(Biotin)与萤火虫荧光素酶(Luciferase)共价结合,形成生物素化荧光素酶(Luciferase-Biotin)的过程。
背景:生物素是一种水溶性维生素,广泛存在于动植物体内,对细胞的生长和繁殖至关重要。而萤火虫荧光素酶则是一种能够催化荧光素氧化产生荧光的酶,具有高度的特异性和敏感性。将生物素与萤火虫荧光素酶结合,可以赋予后者新的生物学特性和应用潜力。
二、修饰原理与方法
修饰原理:生物素酰化修饰通常利用生物素羧基载体蛋白(BCCP)作为中介,将生物素与特定的氨基酸残基(如赖氨酸)共价结合。在萤火虫荧光素酶的生物素酰化修饰中,可以将编码BCCP C端功能域的基因融合到萤火虫荧光素酶的cDNA末端,通过大肠杆菌生物素合成酶的催化作用,实现生物素与荧光素酶的共价结合。
修饰方法:
基因融合:将BCCP C端功能域基因与萤火虫荧光素酶cDNA进行融合,构建融合表达质粒。
表达与纯化:将融合表达质粒导入大肠杆菌等表达系统,进行诱导表达和纯化。
生物素化修饰:利用大肠杆菌生物素合成酶对纯化后的融合蛋白进行生物素化修饰,形成Luciferase-Biotin。
三、功能与应用
功能:生物素化修饰后的萤火虫荧光素酶(Luciferase-Biotin)不仅保留了原有的荧光催化活性,还获得了与生物素结合的特性。这种特性使得Luciferase-Biotin能够作为生物探针或标记物,在生物学研究和应用中发挥重要作用。
应用:
生物检测:利用Luciferase-Biotin与亲和素或链霉亲和素的特异性结合能力,可以构建高灵敏度的生物检测系统,用于检测蛋白质、核酸等生物分子的存在和含量。
生物成像:Luciferase-Biotin还可以作为生物成像的标记物,通过荧光显微镜或流式细胞仪等仪器观察生物体内特定分子的分布和变化。
药物筛选:在药物研发过程中,Luciferase-Biotin可以作为药物筛选的标记物,用于评估药物与靶标分子的相互作用和药效。
产地:西安
规格:1mg 5mg 10mg
纯度:99%
状态:固体/粉末
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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