质粒提取磁珠试剂盒

英文名称：Plasmid extraction magnetic bead kit

本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统，从样品中分离纯化**质粒DNA，特殊包被的磁珠，在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程不涉及有毒试剂，安全、便捷、提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组DNA(OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7～2.0之间，可以应用到各类下游分子生物学实验。

适用范围

适用于各种质粒DNA的提取，适用于自动化核酸提取平台。

试剂盒包装及组成

图谱：

注意事项

1.菌种过夜培养OD值需达到0.1以上。

2.磁珠用前一定要充分混匀。

3.取过夜培养的菌液离心后，尽量吸干净上清，否则可能影响质粒纯度。

4.整个裂解过程操作尽量温和，并在要求时间内完成。

5.如果菌液浓度较高，则建议磁珠量可适当增加，以获取高浓度质粒。

操作方法

1.裂解

取1-2ml（低拷贝质粒可取2-5ml）过夜培养的菌液至1.5mlEP管中，12,000rpm离心1min，尽量吸净上清，加入100μl Buffer A（高拷贝可用50ul），振荡重悬菌体，保证无菌块存在。加入100μl Buffer B温和颠倒混匀6～9次，至溶液清澈可见，时间3min。加入75μl Buffer C立即温和颠倒混匀6～9次，溶液出现絮状沉淀，静置冰上2min以充分中和。12,000rpm离心10min。

2.结合

取上清于新的1.5mlEP管中,加入振荡混匀的磁珠5μl，异丙醇250μl（自备），颠倒混匀5min。将EP管置于磁力架上进行磁分离，吸弃废液（吸净管盖及管底残液）。

3.洗涤

加入500μl洗涤液，轻柔混匀1-2min，然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；

4.洗脱

室温晾干5min，加入100μl洗脱液，缓慢抽吸混匀，65℃温浴10min。每隔2～3min轻摇EP管几下混匀。然后磁分离，小心吸取上清液至新的EP管中，进行下游实验。

常见问题及参考意见

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