一、概述
FITC-dextran,全称为异硫氰酸荧光素-葡聚糖(Fluorescein Isothiocyanate-Dextran),是一种由Fluorescein Isothiocyanate(FITC)和Dextran(葡聚糖)两部分组成的生物标记荧光染料。FITC是一种绿色荧光染料,常用于标记和可视化生物分子、细胞和组织,具有良好的光稳定性和荧光亮度。而Dextran则是一种从淀粉中提取的复杂碳水化合物,具有良好的水溶性、低毒性和低免疫原性,常用作药物载体或生物标记物。
二、结构与性质
结构:FITC-dextran的制备通常涉及将FITC的异硫氰酸基团共价偶联到Dextran分子上,形成稳定的荧光标记多糖化合物。
荧光性质:FITC-dextran在488纳米(或495纳米)处激发,并在约525纳米处发射绿色荧光,这种光谱性质使其适用于多种荧光显微镜和流式细胞仪。
溶解性:FITC-dextran具有良好的水溶性,可以溶于水、盐溶液、DMSO、甲酰胺等极性有机溶剂,但不溶于低脂肪族醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺等。
三、应用领域
FITC-dextran在生物学和医学研究中具有广泛的应用,包括但不限于:
细胞内标记:用于追踪和可视化细胞内分子、细胞器和细胞吞噬过程。
组织切片和免疫组化:用于可视化组织样本中的特定蛋白质或抗原。
药物传递研究:作为药物载体或用于评估药物的释放和传递。
细胞吞噬研究:用于研究细胞内吞噬过程,如胞吞和胞吐。
细胞渗透性研究:如血脑屏障通透性及破坏程度的测定。
细胞损伤与凋亡研究:可揭示热休克引起的细胞损伤,并研究细胞凋亡的早期和晚期阶段。
四、使用注意事项
储存方式:应避光保存,一般储存温度为4°C,对于溶液形式的产品,可以在-80°C或-20°C下长期保存。
溶液配制:配制溶液时,可以使用超声、涡旋振荡或加热(40-60°C)等方法助溶,若有不溶物,可短暂离心处理。
除菌处理:建议使用过滤方式除菌,避免高温高压灭菌,因为可能导致荧光素的释放。
实验条件优化:Dextran的分子量、电荷数、标记情况等因素都可能影响实验结果,因此需要根据实验目的、细胞种类和培养特性等条件进行摸索和优化。
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