标记方法

1. 材料准备：

• 鸢尾素溶液：将鸢尾素溶解在适量的缓冲液（如PBS）中，制备所需浓度。

• Cy7.5溶液：准备Cy7.5的溶液，通常使用NHS酯形式以便与鸢尾素的氨基发生反应。

2. NHS酯法（常用标记方法）：

• 反应完成后，可以通过透析、超滤或凝胶过滤去除未结合的Cy7.5染料，以获得纯化的标记鸢尾素。

• 将Cy7.5-NHS酯与鸢尾素溶液混合，通常在pH 7.4的缓冲液中进行反应，确保反应环境适合酰胺键的形成。

• 反应时间一般为1-2小时，室温下进行，必要时可轻微加热。

• 反应：

• 去除未反应染料：

3. 点击化学法：

• 如果鸢尾素或其衍生物上有适合的反应基团（如叠氮或炔烃），可以使用点击化学方法进行标记。

Cy7.5荧光染料

• 特性：Cy7.5是一种近红外荧光染料，发射波长较长，适合活体成像，具有较好的光稳定性。

• 优势：近红外成像能减少组织的吸收和散射，提高成像的深度和灵敏度。

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