名称:罗丹明标记鸟氨酸 RB-L-Ornithine
包装:mg级和g级
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
储存时间:1年
保存:冷藏
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验
标记步骤
罗丹明-NHS酯的溶解:
将罗丹明-NHS酯溶解在无水DMSO中,浓度为1-5 mg/mL,以确保均匀溶解。
鸟氨酸的溶解:
将鸟氨酸溶解在pH 7.0-8.0的PBS缓冲液中,浓度约为1-5 mg/mL,确保氨基能够与NHS酯反应。
偶联反应:
将罗丹明-NHS酯溶液逐滴加入到鸟氨酸溶液中,反应比例通常为1:1或略微过量的罗丹明-NHS酯。
在室温下避光反应1-2小时,确保反应充分。
终止反应:
反应完成后,加入少量甘氨酸或乙醇胺,以终止未反应的NHS酯,防止非特异性偶联。
纯化:
使用透析或凝胶过滤柱去除未反应的罗丹明染料和杂质。
可使用HPLC进一步纯化,以确保产物的纯度。
验证标记:
使用UV-Vis光谱或荧光光谱检测罗丹明的特征吸收峰和发射峰,以确认标记成功(罗丹明通常在λ=550 nm附近吸收,在λ=570 nm发射)。
HPLC分析可用于确认标记产物的纯度和偶联效率。
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