CRISPR基因编辑细胞株构建，技术服务

CRISPR 基因编辑细胞株构建是一项利用 CRISPR/Cas9 技术来精确修饰细胞基因组的重要技术。它为生命科学研究、疾病模型建立以及药物研发等领域提。

CRISPR/Cas9 系统由 Cas9 核酸酶和向导 RNA（gRNA）组成。gRNA 能够引导 Cas9 核酸酶特异性地识别并切割细胞基因组中的特定目标序列。通过利用细胞自身的 DNA 修复机制，可以实现对目标基因的敲除、插入或修饰。

在构建 CRISPR 基因编辑细胞株时，首先需要确定目标基因和编辑策略。根据研究目的，可以选择敲除目标基因、引入特定突变或插入新的基因片段等。然后，设计合适的 gRNA，并将其与 Cas9 表达载体一起导入目标细胞中。

导入方法通常包括转染、病毒感染等。转染可以直接将基因编辑工具导入细胞，但效率可能较低。病毒感染则可以高效地将基因编辑工具传递到细胞中，但需要注意病毒的安全性和潜在的免疫反应。

一旦基因编辑工具成功导入细胞，Cas9 核酸酶就会在 gRNA 的引导下对目标基因进行切割。细胞通过非同源末端连接（NHEJ）或同源定向修复（HDR）来修复 DNA 断裂。在 NHEJ 过程中，通常会引入随机的插入或缺失，从而实现基因敲除。在 HDR 过程中，可以提供外源的修复模板，实现精确的基因插入或修饰。

CRISPR 基因编辑细胞株构建具有许多优势。首先，它具有高效性和特异性，可以快速准确地实现对目标基因的编辑。其次，该技术操作相对简单，成本较低，适用于大规模的细胞株构建。此外，CRISPR 基因编辑细胞株可以长期稳定地表达编辑后的基因，为后续的研究提供可靠的实验模型。

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

产品：

基因单碱基突变

基因多位点单碱基编辑

FGA基因座单碱基突变

小鼠及猕猴胚胎MECP2基因T158M单碱基突变体系

DFR基因的单碱基突变

基因组中多个单碱基突变

HCT116细胞CTNNB1基因定点突变

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。