DBCO-PEG-FITC(Dibenzocyclooctyne-Polyethylene Glycol-Fluorescein)是一种功能化的荧光探针,结合了二苯基环辛烯(DBCO)的反应性、聚乙二醇(PEG)的生物相容性和荧光素(FITC)的强荧光特性。
结构
DBCO:二苯基环辛烯是一种高反应性的化合物,常用于“点击化学”,与含有叠氮基(-N₃)化合物进行高效的偶联反应。
PEG:聚乙二醇(PEG)作为连接分子,提供了优良的水溶性和生物相容性,增强了该探针在生物体内的稳定性。
FITC:荧光素(FITC)是一种强荧光染料,能够在紫外或可见光激发下发出明亮的荧光。
合成方法
材料准备:
DBCO、PEG(通常是PEG-NH₂或PEG-COOH)、FITC作为起始材料。
合成步骤:
PEG的活化:可以使用NHS酯或其他活化剂将PEG的羧基活化。
偶联反应:将活化的PEG与FITC反应,形成FITC-PEG。
与DBCO偶联:将得到的FITC-PEG与DBCO的氨基或羧基反应,形成**的DBCO-PEG-FITC。
反应条件:
反应通常在适宜的缓冲液(如PBS,pH 7.4)中进行,反应时间从几个小时到一夜不等。
纯化:
通过透析、色谱分离(如高效液相色谱HPLC)等方法去除未反应的DBCO、PEG和FITC,以获得纯化的DBCO-PEG-FITC。
表征:
使用UV-Vis光谱、荧光光谱、质谱(MS)、核磁共振(NMR)等技术对合成的DBCO-PEG-FITC进行表征,以确认分子的结构和标记效率。
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