荧光素聚乙二醇活性酯 (FITC-PEG-NHS) 是一种结合了荧光素(FITC)、聚乙二醇(PEG)和 N-hydroxysuccinimide(NHS)活性酯的化合物。它在生物标记、药物递送和生物成像等领域具有重要应用。
结构
荧光素(FITC):荧光素是一种强荧光染料,广泛应用于生物成像和细胞标记。其激发波长约为495 nm,发射波长约为520 nm。
聚乙二醇(PEG):PEG 是一种水溶性聚合物,具有优良的生物相容性,能提高分子的溶解度和稳定性。
NHS 活性酯:NHS 是一种常用的活化试剂,可以与氨基(-NH₂)反应,形成稳定的酰胺键,使得 FITC-PEG-NHS 具有良好的偶联能力。
合成方法
材料准备:
荧光素(FITC)、聚乙二醇(如 PEG-NH₂ 或 PEG-COOH)和 NHS 作为起始材料。
合成步骤:
将 FITC 和活化的 PEG-NHS 混合,在适当的缓冲条件下反应,形成 FITC-PEG-NHS。
如果使用 PEG-COOH,可以通过与 NHS 反应,生成活性酯 PEG-NHS。
PEG 的活化:
偶联反应:
反应条件:
通常在 pH 7.0-8.0 的缓冲液(如 PBS)中进行反应,反应时间从几小时到一夜不等。
纯化:
通过透析或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的 FITC 和 PEG,得到纯化的 FITC-PEG-NHS。
表征:
使用 UV-Vis 光谱、荧光光谱、质谱(MS)和核磁共振(NMR)等技术对合成的 FITC-PEG-NHS 进行表征,以确认分子的结构和标记效率。
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