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荧光素聚乙二醇活性酯 FITC-PEG-NHS
发布时间:2024-10-28     作者:zyl   分享到:

荧光素聚乙二醇活性酯 (FITC-PEG-NHS) 是一种结合了荧光素(FITC)、聚乙二醇(PEG)和 N-hydroxysuccinimide(NHS)活性酯的化合物。它在生物标记、药物递送和生物成像等领域具有重要应用。

结构

  1. 荧光素(FITC):荧光素是一种强荧光染料,广泛应用于生物成像和细胞标记。其激发波长约为495 nm,发射波长约为520 nm。

  2. 聚乙二醇(PEG):PEG 是一种水溶性聚合物,具有优良的生物相容性,能提高分子的溶解度和稳定性。

  3. NHS 活性酯:NHS 是一种常用的活化试剂,可以与氨基(-NH₂)反应,形成稳定的酰胺键,使得 FITC-PEG-NHS 具有良好的偶联能力。

合成方法

  1. 材料准备:

    • 荧光素(FITC)、聚乙二醇(如 PEG-NH₂ 或 PEG-COOH)和 NHS 作为起始材料。

  2. 合成步骤:

    • 将 FITC 和活化的 PEG-NHS 混合,在适当的缓冲条件下反应,形成 FITC-PEG-NHS。

    • 如果使用 PEG-COOH,可以通过与 NHS 反应,生成活性酯 PEG-NHS。

    • PEG 的活化:

    • 偶联反应:

  3. 反应条件:

    • 通常在 pH 7.0-8.0 的缓冲液(如 PBS)中进行反应,反应时间从几小时到一夜不等。

  4. 纯化:

    • 通过透析或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的 FITC 和 PEG,得到纯化的 FITC-PEG-NHS。

  5. 表征:

    • 使用 UV-Vis 光谱、荧光光谱、质谱(MS)和核磁共振(NMR)等技术对合成的 FITC-PEG-NHS 进行表征,以确认分子的结构和标记效率。

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