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荧光FITC偶联乙酰胆碱酯酶(FITC-AChE;FITC-acetylcholinesterase)
发布时间:2024-11-04     作者:WYQ   分享到:

定义:通过化学方法将异硫氰酸荧光素(FITC)与乙酰胆碱酯酶(AChE)结合形成的荧光标记物。

制备方法:

AChE的获取:从适当的生物来源(如电鳗)中提取并纯化AChE。

FITC的活化:将FITC溶解在适当的溶剂中,并加入碱性催化剂(如碳酸钠或碳酸氢钠)使其活化,形成具有反应活性的FITC-异硫氰酸酯。

偶联反应:在适当的条件下(如控制pH值、温度和时间),将活化的FITC与AChE进行偶联反应,使FITC通过共价键连接到AChE的特定氨基酸残基上(如赖氨酸的ε-氨基)。

纯化与表征:通过适当的纯化步骤(如透析、离心、色谱分离等)去除未结合的FITC和其他杂质,并对得到的FITC-AChE进行表征(如质谱、酶活性测定、荧光光谱等),确认其结构和性质。

应用:

荧光标记:FITC-AChE可用于细胞成像、组织染色等荧光标记实验,帮助研究人员观察和研究AChE在生物体内的分布和动态变化。

酶活性研究:通过荧光标记,可以更方便地研究AChE的酶活性,包括其催化机制、抑制剂筛选等。

神经科学研究:FITC-AChE在神经科学研究中具有重要价值,可用于研究神经递质传递、突触可塑性等过程。

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