亚克隆重组质粒的构建,定制服务
亚克隆重组质粒的构建在分子生物学研究中扮演着关键角色,它为基因功能的深入剖析和多样化应用开辟了道路。
构建亚克隆重组质粒的起始点是已有的重组质粒或含有目的基因的 DNA 来源。这个原始材料中蕴含着我们想要进一步研究的基因信息,但可能存在于复杂的基因环境中,不利于特定目的的研究,因此需要通过亚克隆来分离和优化。
第一步是设计亚克隆方案,这涉及到选择合适的亚克隆载体。亚克隆载体需要具备一系列理想的特性。比如,具有合适的复制起点,以确保在宿主细胞中能够稳定且高效地复制。常见的原核生物复制起点如 ColE1 可以使质粒在大肠杆菌中大量复制,为后续的基因操作提供充足的材料。同时,载体必须带有有效的选择标记,像氨苄青霉素抗性基因、卡那霉素抗性基因等。这些抗性基因使得在转化宿主细胞后,可以通过在含有相应抗生素的培养基中培养来筛选阳性克隆。
在选择好载体后,要对原始质粒和亚克隆载体进行酶切处理。这需要精心挑选限制酶,依据目的基因两端和亚克隆载体上的酶切位点来确定。例如,如果目的基因两侧是 BamHI 和 SalI 的识别位点,那么就选择这两种酶对原始质粒和亚克隆载体进行酶切。酶切反应要在严格的条件下进行,包括合适的缓冲液、适宜的温度(多数限制酶的**温度为 37℃)和准确的反应时间,以保证酶切的特异性和完整性。
产品:
CRISPR/CAS9介导基因敲入
CRISPR/Cas9条件性基因敲除鼠
CRISPR/Cas9系统基因敲除个别外显子
CRISPR/Cas9系统介导Slc6a6基因敲除大鼠
CRISPR/Cas9系统介导的地衣芽孢杆菌基因敲除
CRISPR/Cas9系统实现基因敲除绝大部分外显子
CRISPR/Cas9协同转录激活调节子(SAM)
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。