PTEN基因亚克隆和pTRE-PTEN反应质粒构建,定制服务
PTEN 基因亚克隆和 pTRE - PTEN 反应质粒构建是基因功能研究和基因治疗相关领域的重要操作。
对于 PTEN 基因亚克隆,首先要从合适的来源获取 PTEN 基因,如从含有 PTEN 基因的细胞系中提取基因组 DNA 或反转录得到 cDNA。选择合适的亚克隆载体是基础,若后续要构建可调控的表达系统,载体应具备一些特殊元件。比如,选择具有多克隆位点方便插入 PTEN 基因,同时具有低背景表达特性的载体。
对 PTEN 基因和亚克隆载体进行酶切。依据 PTEN 基因序列信息,确定合适的限制酶。假设 PTEN 基因存在 BamHI 和 XhoI 酶切位点,就用这两种酶分别处理基因和载体,产生匹配的粘性末端。酶切反应需在合适的缓冲液和温度条件下进行,确保酶切的准确性,使 PTEN 基因能从原始 DNA 中准确分离出来。
接着进行连接反应,利用 DNA 连接酶将 PTEN 基因与亚克隆载体连接。在连接体系中,要控制好 PTEN 基因和载体的浓度比例,保证高效连接。将连接产物转化到合适的宿主细胞(如大肠杆菌)中,利用载体上的选择标记(如氨苄青霉素抗性基因),在含有氨苄青霉素的培养基上筛选阳性克隆。通过菌落 PCR、酶切鉴定和测序等方法验证亚克隆结果。
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
产品:
ERα基因shRNAi慢病毒载体的构建
ESC或iPSC干细胞点突变
ESC或iPSC干细胞基因敲入
ESC或iPSC干细胞敲除
FGA基因座单碱基突变
GM-CSF融合表达质粒
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。