克隆小鼠趋化因子Fractalkine(FK)基因构建真核表达质粒，定制服务

克隆小鼠趋化因子 Fractalkine (FK) 基因并构建真核表达质粒对于研究其在免疫应答、炎症反应等生理病理过程中的作用具有重要意义。

首先，获取含有 FK 基因的模板。可以从小鼠组织（如免疫相关组织）中提取总 RNA，然后通过反转录 - PCR（RT - PCR）技术获取 FK 基因。设计特异性引物是 RT - PCR 的关键，引物要依据 FK 基因的已知序列设计，确保能够特异性地扩增 FK 基因。在 RT - PCR 过程中，要使用**的反转录酶和 DNA 聚合酶，并且要优化反应条件，包括退火温度、延伸时间等，以获得**、特异性强的 FK 基因片段。

选择合适的真核表达质粒作为载体。真核表达质粒需要具备在真核细胞中表达的必要元件。例如，具有合适的启动子，如 CMV 启动子，能够有效地启动 FK 基因在真核细胞中的转录。同时，还应包含内含子序列以增强基因表达效率，以及多聚腺苷酸化信号来保证 mRNA 的稳定性。此外，载体上要有选择标记，如氨苄青霉素抗性基因或新霉素抗性基因，方便后续在细菌中筛选含有重组质粒的菌落，以及在真核细胞中筛选成功转染的细胞。

对 FK 基因和真核表达质粒进行酶切处理。根据 FK 基因两端的序列和质粒上的多克隆位点，选择合适的限制酶。比如，如果 FK 基因两端有 EcoRI 和 HindIII 酶切位点，而质粒的多克隆位点也有这两个位点，就使用这两种酶对基因和质粒进行双酶切。酶切反应要在合适的缓冲液和 37℃温度下进行，确保酶切的准确性。

齐岳生物生物自主开发的 CRISPR 细胞基因编辑系统，显著提高基因敲入细胞株构建过程中的高同源重组效率，并降低随机插入风险。

产品：

gRNA载体（单gRNA）构建

gRNA载体（双gRNA）构建

H19过表达质粒(pcDNA3.1-H19)

HBsAg融合表达质粒

HCT116细胞CTNNB1基因定点突变

HCT116细胞敲除NLRP6基因

HCT116细胞系敲除TP53基因

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

厂家：西安齐岳生物

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。