shRNA质粒克隆，定制服务

首先，设计 shRNA 序列至关重要。shRNA 由茎环结构和两端的粘性末端或平末端组成，其设计需要依据目标基因的序列信息。通常选择与目标基因 mRNA 互补的序列作为核心，一般长度在 19 - 29bp。例如，针对特定癌基因的 mRNA 序列，设计出特异性高的 shRNA 序列，同时要避免与其他非目标基因的同源性，以减少脱靶效应。

在合成 shRNA 寡核苷酸后，需要对其进行退火处理。将两条互补的寡核苷酸链在合适的缓冲液中，通过加热和缓慢冷却的过程，使它们退火形成双链 shRNA 结构。这个过程需要精确控制温度和时间，保证退火的充分性和准确性。

选择合适的质粒载体是 shRNA 质粒克隆的重要环节。载体通常具有 RNA 聚合酶 Ⅲ 启动子，如 U6 或 H1 启动子，它们能够有效地驱动 shRNA 在细胞内的转录。同时，载体还应包含合适的选择标记，如氨苄青霉素抗性基因或卡那霉素抗性基因，方便筛选含有重组质粒的宿主细胞。

对载体进行酶切处理，一般使用限制酶在多克隆位点处切开载体，创造与 shRNA 末端相匹配的粘性末端或平末端。酶切反应需要在适宜的缓冲体系下，于特定温度（如 37℃）下进行，确保酶切的完全性。

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

产品：

hTERT-P2A-EGFP基因的真核表达质粒

Human CRISPRa (SAM) Library

Human CRISPRi Library

Human Epigenetic Genes KO Library

Human Ubiquitination-related Genes KO Library

Ifi47的过表达质粒

IGF-1过表达质粒

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

厂家：西安齐岳生物

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。