shRNA基因敲低解决方案,定制服务
shRNA 基因敲低为研究基因功能提供了有力的途径,以下是一套完整的解决方案。
在设计阶段,针对目标基因进行全面分析。利用生物信息数据库和专业软件,搜索基因的所有转录本信息,选择保守且特异性高的区域设计 shRNA。除了考虑与目标基因 mRNA 的互补性,还要关注潜在的脱靶效应。通过序列比对等方法,排除与其他基因有高同源性的 shRNA 序列。例如,对于一个参与细胞代谢的多基因家族成员,要确保设计的 shRNA 只针对特定成员,而不影响其他家族成员的功能。
构建 shRNA 表达载体时,根据实验需求选择合适的载体类型。如果是在哺乳动物细胞中进行基因敲低,可选择具有哺乳动物细胞兼容启动子(如 CMV、U6 等)的载体。对于需要长期稳定表达 shRNA 的情况,载体的稳定性和整合能力是重要考量因素。在载体构建过程中,采用**的酶切和连接试剂,保证 shRNA 准确插入载体的多克隆位点。同时,对构建好的载体进行严格的质量控制,通过测序验证 shRNA 序列的正确性。
细胞水平的转染是关键步骤。根据细胞类型选择合适的转染方法,如脂质体转染适用于多种贴壁细胞,电转染对于一些难转染的细胞可能更有效。优化转染条件,包括转染试剂与 DNA 的比例、细胞密度、转染时间等。对于一些对转染试剂敏感的细胞,可尝试不同品牌或类型的转染试剂。在转染后,通过合适的筛选方法获得稳定表达 shRNA 的细胞株。如果载体带有抗生素抗性基因,可以使用相应的抗生素进行筛选。
齐岳生物生物提供基因敲入细胞定制服务,荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等均可实现。我们提供其定制服务,包括多种类型的细胞基因KI和全流程的服务支持。
产品:
Probe-RNA体外转录载体
pRP.ExBi-EF1α-Loxp-Stop-Loxp-SRPK1质粒
pSilencer2.1-cathepsin B质粒
PTEN基因亚克隆和pTRE-PTEN反应质粒构建
RAW264.7细胞敲除Pik3r1
RNAi基因敲减细胞系构建服务
RNA体外转录载体
RNF20基因过表达质粒载体
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。