shRNA基因敲低细胞稳转株，定制服务

shRNA 基因敲低细胞稳转株的建立在基因功能研究。首先，选择合适的细胞系是基础。根据研究目的，确定是使用肿瘤细胞系、正常体细胞系还是干细胞系等。不同的细胞系具有不同的生物学特性，如增殖速度、对转染试剂的敏感性等。例如，在研究肿瘤相关基因功能时，选择相应的肿瘤细胞系，如乳腺癌细胞系 MCF - 7，要充分了解其生长条件、培养要求和基因表达谱等信息。

构建 shRNA 表达载体，确保其具有高效的基因敲低能力。载体的设计要包含合适的启动子驱动 shRNA 转录，如 U6 启动子在 RNA 聚合酶 Ⅲ 的作用下能稳定转录 shRNA。同时，在载体上添加选择标记基因，如嘌呤霉素抗性基因或新霉素抗性基因。将设计好的 shRNA 序列通过酶切和连接等标准分子生物学操作准确插入到载体的多克隆位点。

转染细胞是关键环节。采用合适的转染方法将 shRNA 表达载体导入细胞。对于贴壁细胞，脂质体转染是常用方法之一。在转染过程中，要精确控制转染试剂和载体 DNA 的用量比例、细胞的接种密度等条件。例如，在脂质体转染 MCF - 7 细胞时，根据细胞培养瓶的面积和细胞数量，准确计算脂质体和 DNA 的量，以达到**的转染效率。

转染后的筛选是获得稳转株的重要步骤。利用载体上的选择标记基因，在含有相应抗生素的培养基中培养细胞。例如，对于携带嘌呤霉素抗性基因的载体，在含有适量嘌呤霉素的培养基中，未成功转染的细胞会被杀死，而成功转染并整合了 shRNA 表达载体的细胞能够存活并继续生长。经过数天至数周的筛选，逐渐形成稳定表达 shRNA 的细胞群体，即稳转株。

齐岳生物生物提供基因敲入细胞定制服务，荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等均可实现。我们提供其定制服务，包括多种类型的细胞基因KI和全流程的服务支持。

产品：

SCIRR 10蛋白截短体真核表达载体

SgRNA-Cas9载体构建

sgRNA质粒克隆

shRNA打靶效率检测载体

shRNA打靶效率检测载体 慢病毒载体（表达shRNA和含有打靶位点的报告基因）

shRNA打靶效率检测载体 慢病毒载体（表达含打靶位点的报告基因）

shRNA干扰对照质粒

shRNA干扰质粒

shRNA基因敲低解决方案

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

厂家：西安齐岳生物

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。