利用shRNA慢病毒载体构建稳转的细胞系，定制服务

利用 shRNA 慢病毒载体构建稳转的细胞系是一项复杂但具有重要意义的实验操作，过程如下：

首先，构建 shRNA 慢病毒载体。这包括设计针对目标基因的 shRNA 序列，方法与构建普通 shRNA 表达载体类似，要保证其特异性和有效性。然后将 shRNA 序列插入到慢病毒载体中，慢病毒载体通常含有必要的元件，如 5' 和 3' 长末端重复序列（LTR），它们对于病毒的整合和转录调控至关重要，还有包装信号（Ψ），用于指导病毒的包装。同时，载体上有启动子（如 U6 启动子）驱动 shRNA 转录，以及合适的选择标记（如嘌呤霉素抗性基因）。

慢病毒的包装是关键环节。将构建好的 shRNA 慢病毒载体与包装质粒共同转染到包装细胞系，常用的是 293T 细胞。包装质粒包含了病毒复制和包装所需的其他基因，如 Gag、Pol、Env 等。在转染过程中，要优化转染条件，包括选择合适的转染试剂（如脂质体转染试剂）、确定转染试剂与 DNA 的比例、合适的细胞密度等。例如，通过预实验确定在特定培养面积下，293T 细胞接种的**数量以及转染试剂和 DNA 的用量，以提高慢病毒的产量和质量。

收集包装好的 shRNA 慢病毒，对目标细胞进行感染。在感染前，要了解目标细胞的特性，如细胞类型（是贴壁细胞还是悬浮细胞）、对病毒的易感性等。对于贴壁细胞，可以在细胞培养皿中直接加入适量的慢病毒悬液；对于悬浮细胞，可通过离心等方法使慢病毒与细胞充分接触。感染过程中，要控制好病毒的用量和感染时间，以达到**的感染效率，同时避免对细胞产生过度毒性。

齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

产品：

Tet诱导哺乳动物基因表达载体

Tet诱导基因表达细胞稳转株构建

TIPE2过表达质粒

Tol2转座酶表达辅助载体

TPX2基因过表达质粒

U2OS细胞敲除ZNF432基因

USP22截短质粒构建

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

厂家：西安齐岳生物

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。