Cas9过表达稳转细胞株,定制服务
首先,选择合适的 Cas9 表达载体是关键。载体需要具备一些关键元件,包括强启动子,如 CMV(巨细胞病毒)启动子,它能在多种细胞类型中驱动 Cas9 基因的高效表达。此外,载体还应包含合适的多克隆位点(MCS),方便 Cas9 基因的插入或其他必要的修饰。同时,要有选择标记,如嘌呤霉素抗性基因或新霉素抗性基因,用于后续筛选稳定表达 Cas9 的细胞。
获取 Cas9 基因,可以通过基因合成或从已有的 Cas9 克隆中获取。如果是基因合成,要确保序列的准确性,可通过测序验证。将 Cas9 基因插入到表达载体的 MCS 中,这一过程需要使用合适的限制酶和连接酶。根据 Cas9 基因两端和 MCS 的酶切位点,选择匹配的限制酶对基因和载体进行酶切,然后利用 DNA 连接酶将 Cas9 基因与酶切后的载体连接,形成重组 Cas9 表达载体。
将重组 Cas9 表达载体导入目标细胞。根据细胞类型选择合适的转染方法,如脂质体转染适用于许多常见的贴壁细胞。在转染过程中,要优化转染条件,包括转染试剂与 DNA 的比例、细胞密度、转染时间等。例如,对于某种特定的细胞系,通过预实验确定在特定培养皿面积下,**的脂质体用量和 DNA 用量,以达到最高的转染效率。
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
产品:
插入序列2000 bp-3000 bp的基因序列
插入序列2000 bp以下的基因序列
插入序列3000 bp-4000 bp的基因序列
插入序列4000 bp-5000 bp的基因序列
大片段DNA精准定点插入
大片段敲除方案,基因敲除细胞方案
大鼠EZH2基因过表达质粒
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。