构建tead4敲减慢病毒载体,定制服务
设计针对 tead4 基因的 shRNA 序列。通过对 tead4 基因 mRNA 序列的生物信息学分析,确定合适的靶点区域。优先选择在 tead4 基因编码蛋白的功能结构域对应的 mRNA 部分,或在基因中相对保守的区域,以确保敲减效果。同时,要严格评估所选序列与其他基因的同源性,避免脱靶效应。例如,在 tead4 基因的特定结构域附近选取长度约为 20bp 的独特序列作为 shRNA 的靶向序列。
设计好 shRNA 序列后,合成两条互补的寡核苷酸链。一条链包含与 tead4 基因 mRNA 互补的序列、发夹环结构(如常用的 TTCAAGAGA)和部分反向互补序列,另一条链则是其完全互补链。合成后,将两条寡核苷酸链在合适的缓冲液中进行退火处理,通过加热至高温(如 95℃)然后缓慢冷却至室温,使它们形成具有发夹结构的双链 shRNA。
选择合适的载体是构建 tead4 敲减载体的关键。常用的载体具有一些必要元件,如启动子、多克隆位点(MCS)和选择标记。对于 shRNA 表达,可选择 RNA 聚合酶 Ⅲ 启动子,如 U6 或 H1 启动子,它们能有效驱动 shRNA 的转录。MCS 要方便 shRNA 序列的插入,其酶切位点需与 shRNA 两端设计的酶切位点匹配。选择标记一般是抗生素抗性基因,如氨苄青霉素抗性基因,用于筛选含有重组载体的宿主细胞。
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
产品:
低氧诱导因子1α(HIF-1α)真核表达质粒
点突变细胞构建
点突变细胞稳转株构建
点突变小鼠
点突变质粒
定点条件性基因过表达小鼠
定点突变服务
动物基因编辑
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。