构建四环素诱导的YAP1敲减的病毒质粒，定制服务

构建四环素诱导的 YAP1 敲减的质粒为研究 YAP1 基因在特定条件下的功能调控提供了有力工具。在设计阶段，针对 YAP1 基因 mRNA 序列进行分析，选择合适的 shRNA 靶点。考虑到四环素诱导的特性，靶点应选择在 YAP1 基因中对其功能有重要影响的区域，且要保证靶点的特异性，避免与其他基因的同源性。通过生物信息学工具和已有的研究数据，确定长度约为 19 - 29bp 的序列作为 shRNA 的靶向序列。

合成两条互补的寡核苷酸链用于构建 shRNA。一条链包含与 YAP1 基因互补的序列、环序列（如 TTCAAGAGA）和部分反向互补序列，另一条是其完全互补链。在合适的缓冲液中，对这两条链进行退火处理，加热至约 90 - 95℃后缓慢冷却，形成具有发夹结构的双链 shRNA。

选择合适的质粒载体，该载体需要具备四环素诱导元件。一般包括四环素响应元件（TRE），它能在四环素或其衍生物（如强力霉素）存在时调控下游基因的表达。同时，载体还应包含启动子（如 U6 启动子用于驱动 shRNA 的转录）、多克隆位点（MCS）和选择标记（如氨苄青霉素抗性基因）。

对质粒载体进行酶切。根据 shRNA 序列和 MCS 的设计，选择合适的限制酶。例如，如果 shRNA 两端设计有 BamHI 和 XhoI 酶切位点，且载体 MCS 也有这两个位点，就使用这两种酶对载体进行双酶切。酶切反应在适宜的缓冲体系下，于 37℃进行，确保酶切完全，使载体在 MCS 处产生与 shRNA 匹配的粘性末端或平末端。

齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

产品：

动物基因编辑

多基因敲除（双敲/多敲）

多肽P18(SAP18)过表达质粒

多转座子载体的构建

非同源/同源多基因敲除

刚地弓形虫过氧化物氧化还原酶基因重组真核表达质粒

高通量DNA突变库构建服务

高通量基因敲除技术

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

厂家：西安齐岳生物

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。