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利用重组慢病毒载体建立稳定表达绿色荧光蛋白细胞系,定制服务
发布时间:2024-11-06     作者:axc   分享到:

利用重组慢病毒载体建立稳定表达绿色荧光蛋白细胞系,定制服务

构建含有 GFP 基因的表达载体。选择合适的质粒载体,它需要具备启动子、多克隆位点(MCS)和选择标记等关键元件。启动子可选择强启动子如 CMV 启动子,它能在多种细胞类型中驱动 GFP 基因的高效表达。MCS 用于插入 GFP 基因,其酶切位点要与 GFP 基因两端设计的酶切位点相匹配。选择标记一般是抗生素抗性基因,如新霉素抗性基因。

将 GFP 基因插入到表达载体的 MCS 中。如果 GFP 基因来源是通过 PCR 扩增,要确保扩增过程使用高保真 DNA 聚合酶,避免碱基突变。扩增后的 GFP 基因和载体分别进行酶切,根据设计的酶切位点选择合适的限制酶,然后利用 DNA 连接酶将 GFP 基因与酶切后的载体连接,形成重组 GFP 表达载体。

将重组 GFP 表达载体导入目标细胞。根据细胞类型选择合适的转染方法,如脂质体转染适用于许多贴壁细胞。对于脂质体转染,要优化转染试剂与 DNA 的比例、细胞密度等参数。例如,在转染 MCF - 7 细胞时,通过预实验确定在特定培养面积下**的脂质体和 DNA 用量。


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齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

产品:

基于CRISPR/Cas9技术构建严重联合免疫缺陷小鼠

基于CRISPR/Cas9技术基因敲除动物

基于CRISPRCas9技术的基因敲入敲除策略

基于CRISPR-Cas9技术构建大肠杆菌基因敲除菌株

基于CRISPR-Cas的基因编辑技术

基于puro标记筛选的safe harbor位点基因敲入(标记筛选)

甲酸脱氢酶基因的定点突变

碱基编辑技术和引导编辑技术


用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

保存:冷藏

厂家:西安齐岳生物


注意事项:

本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。



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