慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞,定制服务
构建用于转染的含 GFP 基因的载体。载体的选择至关重要,它需要具有在 hESCs 中稳定表达的元件。可以选择具有合适启动子(如 EF1 - α 启动子,其在 hESCs 中有较好的活性)的质粒载体,同时载体应包含多克隆位点(MCS)用于插入 GFP 基因和选择标记(如嘌呤霉素抗性基因)。将 GFP 基因插入到载体的 MCS 中,通过酶切和连接等标准分子生物学操作完成。
在转染后,要对 hESCs 进行特殊的处理和观察。由于电穿孔可能对细胞造成一定的应激,转染后的细胞需要在适宜的恢复培养基中培养一段时间,以促进细胞的恢复和稳定。通过荧光显微镜定期观察细胞,可看到 GFP 在 hESCs 中的表达情况。表达 GFP 的 hESCs 在荧光显微镜下呈现出明亮的绿色,这使得我们可以追踪这些细胞在后续培养、分化实验中的行为。例如,在研究 hESCs 的分化潜能时,可以观察 GFP 标记的 hESCs 在诱导分化条件下向不同细胞类型分化的过程,以及它们在分化过程中的迁移和分布情况。同时,可以通过流式细胞术等方法对 GFP 表达的阳性细胞比例进行定量分析,进一步了解转染效率和细胞状态。
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
产品:
碱基定向突变
建立shRNA敲低稳转株
角蛋白支架联合转化生长因子-β3(TGF-β3)基因过表达载体质粒
截短型BAP31/GST基因重组质粒的构建
截短型重组质粒的构建
截断突变载体系统
抗菌肽Protegrin基因的定点诱变
克隆小鼠趋化因子Fractalkine(FK)基因构建真核表达质粒
利用CRISPR/Cas9技术编辑海洋生物基因片段
利用CRISPR/Cas9技术编辑水稻温敏不育基因
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。