绿色荧光蛋白和胸苷激酶基因共表达的慢病毒载体的构建，定制服务

获取 GFP 和 TK 基因。GFP 基因可从含有 GFP 的模板（如已有的 GFP 表达质粒或通过基因合成获得）中获取，TK 基因可从相应的基因文库或通过 PCR 从含有 TK 基因的细胞或组织的基因组 DNA 或 cDNA 中扩增得到。在 PCR 扩增 TK 基因时，要根据其已知序列设计特异性引物，确保扩增的准确性，同时使用高保真 DNA 聚合酶。

选择合适的载体用于构建共表达载体。载体需要具备一些关键元件，如启动子、多克隆位点（MCS）和选择标记等。可选择具有强启动子（如 CMV 启动子）的载体，它能同时驱动 GFP 和 TK 基因的高效表达。MCS 要方便插入两个基因，可通过改造或选择具有合适酶切位点排列的 MCS。选择标记一般是抗生素抗性基因，如氨苄青霉素抗性基因，用于筛选含有重组载体的宿主细胞。

对载体进行酶切，根据 GFP 和 TK 基因两端的酶切位点以及载体 MCS 的设计，选择合适的限制酶。例如，如果 GFP 基因一端有 EcoRI 位点，另一端有 HindIII 位点，TK 基因一端有 BamHI 位点，另一端有 XhoI 位点，而载体 MCS 有这些位点或可通过改造具备这些位点，就使用这些酶对载体进行酶切。酶切反应在适宜的缓冲体系下，于 37℃进行，确保酶切完全，使载体在 MCS 处切开，产生合适的粘性末端或平末端。

齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

产品：

全基因敲除，制作基因敲除小鼠

全基因敲除cas9

全基因敲除小鼠

全基因组CRISPRa文库

全基因组CRISPRi文库

全基因组CRISPR基因敲除文库

全基因组范围的CRISPR敲除（GeCKO V2基因编辑文库）质粒文库

全基因组范围的CRISPR敲除(GeCKO V2基因编辑文库)

全基因组获得性功能筛选-慢病毒文库（转录激活基因编辑文库）

全基因组获得性功能筛选-质粒文库（转录激活基因编辑文库）

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

厂家：西安齐岳生物

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。