慢病毒制备和导入细胞,定制服务
将外源物质(如基因、质粒、病毒等)导入细胞是现代生物学研究和生物技术应用中的关键环节,以下是关于这一过程的详细描述。
首先,选择合适的导入方法至关重要,这取决于多种因素,包括细胞类型、外源物质的性质以及实验目的等。常见的导入方法有物理方法、化学方法和生物方法。
物理方法中的电穿孔法是一种常用手段。通过在短时间内施加高电压脉冲,使细胞膜产生短暂的可逆性穿孔,从而允许外源物质进入细胞。在电穿孔过程中,需要精确控制电压、脉冲时间和脉冲次数等参数。不同的细胞类型对这些参数的要求差异很大,例如,对于细菌细胞,可能只需要较低的电压和较短的脉冲时间,而对于哺乳动物细胞,尤其是一些较为敏感的细胞,如干细胞,则需要更精细地调整参数,以避免对细胞造成过度损伤。同时,电穿孔缓冲液的选择也会影响导入效率,合适的缓冲液可以维持细胞的生理状态,提高导入的成功率。
化学方法中,脂质体转染是应用广泛的一种。脂质体是一种由脂质双分子层组成的人工囊泡,可以与外源 DNA 或 RNA 等物质结合形成复合物。这些复合物能够与细胞膜相互作用,通过内吞作用将外源物质带入细胞。在脂质体转染时,要优化转染试剂与外源物质的比例以及细胞密度等条件。不同的细胞株对脂质体的种类和浓度有不同的要求,例如,某些容易转染的细胞株可能对常用的商业化脂质体转染试剂有较好的耐受性,而一些难转染的细胞则可能需要尝试不同品牌或类型的脂质体,或者调整转染试剂与外源物质的比例。此外,细胞在培养皿中的密度也会影响转染效率,密度过高或过低都可能导致转染效果不佳。
齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务,包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体(含 Cas9)与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中,在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后,细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复(HDR)实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。
产品:
CRISPR/Cas9基因敲入小鼠
CRISPR/Cas9技术构建 miRNA-29 b1基因敲除小鼠
CRISPR/Cas9技术构建小鼠癌症模型
CRISPR/Cas9技术应用之基因敲除
Crispr/Cas9技术在CHO细胞中基因敲除
CRISPR/Cas9技术在基因组中进行定点基因突变
CRISPR/CAS9介导基因敲入
CRISPR/Cas9条件性基因敲除鼠
CRISPR/Cas9系统基因敲除个别外显子
CRISPR/Cas9系统介导Slc6a6基因敲除大鼠
CRISPR/Cas9系统介导的地衣芽孢杆菌基因敲除
CRISPR/Cas9系统实现基因敲除绝大部分外显子
CRISPR/Cas9协同转录激活调节子(SAM)
CRISPR/Cas9质粒
CRISPR-gRNA文库筛选基因靶点服务
CRISPRi表观基因组编辑靶向 TNFR1
CRISPR基因编辑CRO服务
CRISPR基因编辑细胞株构建
CRISPR敲除(GeCKO V2基因编辑文库)慢病毒文库
CRISPR文库质粒构建
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。