慢病毒及稳转细胞构建,定制服务
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
构建合适的表达载体是关键步骤。对于稳转细胞构建,载体通常包含启动子、目的基因、多克隆位点(MCS)和选择标记等元件。启动子要根据细胞类型和目的基因的表达需求选择,如 CMV 启动子在多种哺乳动物细胞中具有较强的启动能力。目的基因可以是要过表达、敲除或敲低的基因,通过酶切和连接等方法插入到载体的 MCS 中。选择标记一般是抗生素抗性基因,如嘌呤霉素抗性基因、新霉素抗性基因等,用于后续筛选稳转细胞。
将构建好的表达载体导入细胞。根据细胞类型选择合适的转染方法,如脂质体转染、电穿孔转染或病毒介导的转染等。脂质体转染适用于多种贴壁细胞,在转染过程中,要优化转染试剂与 DNA 的比例、细胞密度等参数。例如,对于 MCF - 7 细胞,通过预实验确定在特定培养皿面积下**的脂质体和 DNA 用量。电穿孔转染则更适合一些难转染的细胞,但需要精确控制电穿孔参数,以减少对细胞的损伤。如果使用病毒介导的转染,需要**行病毒包装,然后用包装好的病毒感染细胞。
产品:
CRISPR基因编辑细胞株构建
CRISPR敲除(GeCKO V2基因编辑文库)慢病毒文库
CRISPR文库质粒构建
CRISPR系统对照载体
CRISPR系统辅助载体
CRlSPR/Cas9 gRNA文库慢病毒包装
DFR基因的单碱基突变
DNA Damage Response Genes MKOv4 Library
eGFP-LIN28A过表达小鼠胚胎干细胞E14细胞系
eGFP-LIN28A敲入的小鼠胚胎干细胞E14细胞系
ERα基因shRNAi慢病毒载体的构建
ESC或iPSC干细胞点突变
ESC或iPSC干细胞基因敲入
ESC或iPSC干细胞敲除
FGA基因座单碱基突变
GM-CSF融合表达质粒
gRNA和Cas9共表达载体
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。