质粒载体介导的表达ERCC1shRNA的质粒构建，定制服务

在基因研究领域，构建质粒载体介导的表达 ERCC1 shRNA 的质粒具有重要意义。首先，在设计环节，ERCC1 作为目标基因，shRNA 序列的设计是关键。通过对 ERCC1 基因的深入了解，运用生物信息学工具，精心挑选出能与 ERCC1 基因 mRNA 特异性结合的 shRNA 序列。这个过程要严格避免与其他非目标基因的 mRNA 产生交叉反应，因为这可能导致脱靶效应，影响实验结果的准确性。在设计好序列后，利用化学合成方法得到含有 shRNA 序列的 DNA 模板，该模板的两端还需巧妙设计上合适的限制性内切酶位点，就像为后续的构建工作安装了精准的 “接口”。

接着是载体的选择与处理。选择合适的质粒载体如同为建筑挑选合适的地基。要考虑载体在目标细胞中的稳定性、表达能力等因素。例如，选择具有合适启动子和筛选标记的质粒。然后使用特定的限制性内切酶对质粒进行双酶切，使质粒线性化，暴露出与 shRNA 模板相匹配的粘性末端，为两者的连接创造条件。

之后便是连接反应，在 DNA 连接酶的催化下，将 shRNA 模板与线性化的质粒载体连接在一起。这一步需要精细调控反应条件，包括温度、时间和酶量等参数，以确保连接反应高效、准确地进行，形成重组质粒。

完成连接后，将重组质粒转化到感受态大肠杆菌细胞中。这就像把种子播撒在肥沃的土壤中，通过含有特定抗生素的培养基进行筛选，只有那些成功接纳了重组质粒的大肠杆菌才能在这种环境中茁壮成长。挑取单菌落进行扩大培养，并提取质粒进行进一步的鉴定。

鉴定过程包括酶切鉴定和测序分析。酶切鉴定可以通过特定的限制性内切酶切割重组质粒，观察是否产生预期大小的片段，初步判断连接是否正确。而测序分析则是对构建质量的**检验，确保 shRNA 序列准确无误地插入到质粒载体中。

定制服务：

Cas9-Cell line Knock-In service（Cas9-CKI）基因定点敲入细胞系

Cas9表达载体，att位点整合载体

Cas9表达载体，P元件转座载体

Cas9表达载体，双整合系统载体

Cas9过表达稳转细胞株

cDNA片段亚克隆至哺乳动物细胞高表达型穿梭载体中

CreERT2表达载体

Cre-Lox调控系统表达对照载体

Cre-Lox调控系统表达辅助载体

Cre-Lox条件性表达载体系统

CRISPR Cas9基因敲除项目

CRISPR Cas9基因敲除项目-大片段敲除

CRISPR Cas9基因敲除项目-单基因敲除

CRISPR Cas9基因敲除项目-多基因敲除

CRISPR Cas9基因敲除项目-移码突变

CRISPR Cas9基因敲入

Crispr/Cas9 基因编辑慢病毒包装

CRISPR/Cas9基因敲除

CRISPR/Cas9基因敲入小鼠

CRISPR/Cas9技术构建 miRNA-29 b1基因敲除小鼠

CRISPR/Cas9技术构建小鼠癌症模型

CRISPR/Cas9技术应用之基因敲除

Crispr/Cas9技术在CHO细胞中基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。