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质粒构建和克隆,定制服务
发布时间:2024-11-07     作者:axc   分享到:

质粒构建和克隆,定制服务

质粒构建是一个复杂而精细的过程。首先,需要确定目标基因或目的片段。这可以通过多种途径获得,比如从基因组中扩增、从 cDNA 文库中筛选或者通过化学合成。如果是从基因组中扩增,需要设计特异性的引物,引物的设计要依据目标基因的序列,确保能够准确地扩增出所需的片段。然后利用聚合酶链反应(PCR)技术,在合适的反应条件下,将目标基因片段扩增出来。

在获得目标基因后,要选择合适的质粒载体。质粒载体就像是一个 “载体船”,它将承载目标基因并在细胞中发挥作用。选择时要考虑载体的类型、大小、复制起点、启动子、筛选标记等因素。例如,对于在哺乳动物细胞中表达的目标基因,需要选择具有哺乳动物细胞兼容的复制起点和强启动子的质粒载体,同时还要有合适的筛选标记,如抗生素抗性基因,方便后续筛选转染成功的细胞。

接着是对质粒载体进行处理。通常采用限制性内切酶对质粒进行切割,使质粒线性化,同时在目标基因片段的两端也添加相应的限制性内切酶位点,以便二者能够连接。这一步就像是为 “船” 和 “货物” 打造合适的接口,使它们能够紧密结合。在切割和处理后,通过 DNA 连接酶将目标基因片段与线性化的质粒载体连接在一起,形成重组质粒。

质粒构建和克隆,定制服务

齐岳生物生物自主开发的 CRISPR 细胞基因编辑系统,显著提高基因敲入细胞株构建过程中的高同源重组效率,并降低随机插入风险。

定制服务:

miRNA、lncRNA表达载体构建

miRNATUD质粒克隆

miRNA过表达/抑制质粒

miRNA质粒克隆

Mouse CRISPRa (SAM) Library

Mouse CRISPRi Library

mRNA体外转录载体

NOS1AP基因单碱基突变

Nrd1点突变体和截短体

pcDNA3.1 GM CSFS融合表达质粒

pcDNA3.1/Cx43真核表达质粒

pcDNA3.1-cathepsin B质粒

pcDNA3-HIF-1α真核表达质粒

PCR介导的定点突变

PEG10重组真核表达质粒

pGEX-4T-2-TK原核表达质粒

pGL3-Basic启动子报告载体

PiggyBac转座酶表达辅助载体

pLenti-Puro - 基因载体质粒


注意事项:

本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。


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