shRNA干扰质粒,定制服务
shRNA 干扰质粒的设计基于对特定基因表达调控的原理。它包含一段能形成发夹结构的 RNA 序列,这个发夹结构就是 shRNA。shRNA 的设计是针对目标基因的 mRNA 序列,通过生物信息学分析,选择与目标基因 mRNA 互补的特定序列。当 shRNA 被转录生成后,它会被细胞内的加工机制识别和处理,形成类似 siRNA(小干扰 RNA)的双链结构。这种双链结构能够与体内的 RNA 诱导沉默复合体(RISC)结合,引导 RISC 识别并结合目标基因的 mRNA,然后通过 RISC 的核酸酶活性将 mRNA 降解,从而实现对目标基因表达的抑制。
在构建 shRNA 干扰质粒时,除了 shRNA 序列本身,还需要合适的质粒载体。这个载体要具备在目标细胞中稳定存在和表达的能力。一般来说,它包含启动子、终止子等基本元件。启动子用于驱动 shRNA 的转录,常见的启动子如 U6 启动子或 H1 启动子,它们在多种细胞类型中都能有效地启动转录过程。载体还可能有筛选标记,例如抗生素抗性基因,方便在转染细胞后筛选出摄取了质粒的细胞。
shRNA 干扰质粒在基因功能研究中有重要应用。当研究人员想要了解某个基因在细胞生理过程或疾病发生发展中的作用时,可以构建针对该基因的 shRNA 干扰质粒,将其转染到细胞模型中。通过检测细胞的表型变化,如细胞增殖、凋亡、分化情况,以及相关基因表达和蛋白水平的变化,来推断目标基因的功能。
齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务,包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体(含 Cas9)与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中,在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后,细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复(HDR)实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。
定制服务:
RNA体外转录载体
RNF20基因过表达质粒载体
RNP法点突变
SCIRR 10蛋白截短体真核表达载体
SgRNA-Cas9载体构建
sgRNA质粒克隆
shRNA打靶效率检测载体
shRNA打靶效率检测载体 慢病毒载体(表达shRNA和含有打靶位点的报告基因)
shRNA打靶效率检测载体 慢病毒载体(表达含打靶位点的报告基因)
shRNA干扰对照质粒
shRNA干扰质粒
shRNA基因敲低解决方案
shRNA基因敲低稳转株构建
shRNA基因敲低细胞稳转株
shRNA慢病毒质粒的构建
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。