蛋白激酶Ca亚类真核表达质粒,定制服务
蛋白激酶 Ca 亚类真核表达质粒的构建旨在使蛋白激酶 Ca 亚类基因在真核细胞中高效表达,以探究其功能。先从细胞或组织样本中提取总 RNA,反转录为 cDNA 后,利用 PCR 扩增蛋白激酶 Ca 亚类基因片段,在设计 PCR 引物时要考虑到后续与质粒载体的连接,选择合适的酶切位点。接着挑选真核表达质粒,如 pcDNA3.0 等,它具有在多种真核细胞中稳定表达的能力,且带有强启动子(如 CMV 启动子)可驱动基因转录。将扩增得到的基因片段与质粒载体用限制性内切酶切割后,通过 DNA 连接酶连接形成重组质粒,把重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞中,在含有氨苄青霉素的培养基上筛选出阳性克隆。对阳性克隆进行鉴定,采用 PCR、酶切分析和测序确保蛋白激酶 Ca 亚类基因正确插入且序列无误。将构建好的真核表达质粒转染到目标真核细胞(如神经元细胞等)中,转染后通过 Western blotting 检测蛋白激酶 Ca 亚类蛋白的表达情况,同时可利用细胞功能实验,如研究其对细胞信号转导、细胞增殖、细胞凋亡等过程的影响。
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
定制服务:
慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞
慢病毒携带shRNA抑制基因表达
慢病毒载体的骨架质粒合成
慢病毒载体介导成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白
慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因在小鼠T淋巴细胞中的表达
慢病毒载体质粒
慢病毒制备和导入细胞
目的基因的亚克隆
片段敲除载体\移码敲除载体
敲除病毒包装服务
敲除单克隆细胞株的构建
敲除特定基因同时敲入外来基因片段
敲除质粒构建服务
敲低因表达的shRNA、慢病毒载体构建
去泛素化酶OTUD6B截短体小鼠模型构建
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。