基因过表达细胞系的构建原理
基因过表达细胞系的构建原理主要包括以下步骤:
选择目标基因:首先,我们需要选择一个目标基因,这个基因将被过表达。
克隆目标基因:我们需要将目标基因从DNA中分离出来,并将其插入到一个载体(如质粒)中。这个过程被称为克隆。
转染细胞:然后,我们需要将含有目标基因的载体转染到宿主细胞中。这可以通过多种方法实现,如脂质介导的转染、电穿孔或病毒介导的转染。
筛选和扩增:一旦细胞被成功转染,我们就需要通过筛选来找出那些成功整合了目标基因的细胞。这通常通过抗生素筛选或者荧光报告筛选来实现。然后,我们会将这些细胞扩增,形成一个稳定过表达目标基因的细胞系。
验证过表达:最后,我们需要验证目标基因是否被成功过表达。这可以通过多种方法实现,如西方印迹、实时定量PCR或免疫荧光等。
定制服务:
CRISPR Cas9基因敲除项目-大片段敲除
HCT116细胞敲除NLRP6基因
L929细胞敲除RIPK1基因
SgRNA-Cas9载体构建
基于AsCas12a的CRISPRi功能基因组学平台
CRISPRi表观基因组编辑靶向 TNFR1
提前引入终止密码子实现无脱靶风险的基因敲除
利用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰小鼠模型
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。如有侵权,可联系我们删除