基因定点突变CRISPR-Cas9技术的基本原理
基因定点突变技术主要是指使用分子生物学方法在基因组中引入特定的突变。这种技术的关键在于能够控制突变发生的位置。目前，CRISPR-Cas9是为使用的基因编辑技术，用于实现基因定点突变。以下是CRISPR-Cas9技术的基本原理和操作步骤：
技术原理
1.CRISPR-Cas9系统介绍: CRISPR（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是一种在细菌和古菌中发现的天然免疫机制。 Cas9是一种酶，能够在RNA的指导下识别并切割特定的DNA序列。 2.工作原理: 通过设计与目标DNA序列互补的小导向RNA（sgRNA），Cas9蛋白被引导到特定的DNA位置。 Cas9蛋白在sgRNA识别的位置切割DNA双链，导致DNA断裂。 细胞利用自身的DNA修复机制来修复这种断裂。在修复过程中，可以引入或修正特定的突变。
操作步骤
1.设计sgRNA:
根据目标基因序列，设计与之互补的sgRNA。设计需考虑特异性和脱靶效应。 2.构建编辑载体: 将sgRNA和Cas9编码序列克隆入适当的载体中。这一载体可通过病毒或其他方法传递到目标细胞中。 3.细胞转染: 使用适当的方法（如脂质体介导转染、电穿孔）将载体转染到目标细胞中。 4.筛选和验证: 筛选已经发生基因编辑的细胞。这通常通过抗生素筛选、细胞存活筛选等方法进行。 使用PCR、测序等技术验证目标基因是否发生了预期的突变。
西安齐岳生物可提供的诱导基因的定点突变定制服务包括：
诱导目的基因定点突变
基因的体外定点突变
寡核苷酸诱导的定点突变
诱导STGC3基因定点突变
利用CRISPR/Cas9系统对基因定点突变
蛋白基因定点突变
甲酸脱氢酶基因的定点突变
谷氨酰胺转胺酶基因的定点突变
PCR介导的定点突变
抗菌肽Protegrin基因的定点诱变
诱导基因组DNA碱基变异
NOS1AP基因单碱基突变
基因单碱基突变
基因多位点单碱基编辑
FGA基因座单碱基突变
小鼠及猕猴胚胎MECP2基因T158M单碱基突变体系
DFR基因的单碱基突变
基因组中多个单碱基突变
HCT116细胞CTNNB1基因定点突变
注意事项：
本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。如有侵权，可联系我们删除
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