miRNA过表达稳定细胞系的发现及其机制

微小RNA（microRNA，miRNA）是一类长度为20-24个核苷酸的非编码RNA分子，它们通过与目标mRNA结合来调控基因表达。近年来，miRNA在多种生物学过程中的重要性逐渐被认识，包括细胞增殖、分化、凋亡和代谢等。

miRNA的发现及其机制

miRNA早在1993年被发现，研究发现其在调控基因表达方面具有重要作用。miRNA主要通过与目标mRNA的3'非编码区结合，抑制其转录或导致其降解。这一机制使得miRNA能够作为重要的调节因子，参与多条信号通路的调控。

miRNA的功能

• 细胞增殖与凋亡：miRNA能够调节细胞生长和死亡，其中某些miRNA，如miR-21，常在多种癌症中上调，促进肿瘤细胞的增殖。

• 细胞分化：miRNA在细胞分化过程中也扮演着关键角色。例如，miR-206在肌肉细胞分化中起到促进作用。

• 调控代谢：miRNA参与多种代谢途径的调控，如脂肪代谢和糖代谢，影响正常生理功能和疾病发展。

miRNA 的生物合成是一个多步骤且受精细调控的过程：

转录起始：在细胞核内，由 RNA 聚合酶 II（少数为 RNA 聚合酶 III）转录 miRNA 基因形成初级 miRNA（pri-miRNA）转录本，其具有帽子结构和多聚腺苷酸尾巴，部分基因簇可产生含多个 miRNA 的转录本。

pri-miRNA 加工：Drosha 酶与辅助因子 DGCR8 组成的微处理器复合体作用于 pri-miRNA，切割其茎环结构基部，释放约 60 - 70 核苷酸的前体 miRNA（pre-miRNA），该过程对序列和结构有特定要求。

pre-miRNA 转运：核转运受体 Exportin - 5 识别 pre-miRNA 并与 Ran - GTP 形成复合物，经核孔复合体将 pre-miRNA 转运至细胞质，之后 Ran - GTP 水解使复合物解离。

pre-miRNA 进一步加工：细胞质中的 Dicer 酶切割 pre-miRNA 双链结构末端，产生约 18 - 25 核苷酸的 miRNA:miRNA * 双链。

miRNA 双链解旋与组装：miRNA:miRNA * 双链与 Argonaute 蛋白等组成 RISC，双链解旋后其中一条链成为成熟 miRNA 并通过与靶 mRNA 互补配对，在转录后调控基因表达，影响细胞多种生理过程。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

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