shRNA慢病毒质粒敲减平台构建

慢病毒基因组为双链RNA，但区别于一般的逆转录病毒，慢病毒具有更广的宿主范围，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。重组慢病毒载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I 型病毒）为基础发展起来的工具载体，其毒性基因已经被剔除并被外源目的基因所取代，属于假型病毒（一次性感染能力而无复制产生新病毒能力）。慢病毒可将靶基因整合到宿主的基因组中，并且能够在细胞系中稳定表达，可以进行稳转细胞株的筛选。被广泛应用于各种细胞系基因敲除、基因过表达和RNA干扰等。

慢病毒敲减（Lentiviral Knockdown），用于特异性地降低或抑制目标基因的表达。慢病毒是一类逆转录病毒，能够感染分裂和非分裂的细胞，并将外源基因稳定地整合到宿主细胞的基因组中，从而实现长期的基因表达调控。该技术的基本原理是通过慢病毒载体将短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）或其他RNA干扰分子（如siRNA）导入目标细胞。shRNA在细胞内转录后形成发夹结构，随后被细胞内的Dicer酶加工成小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA），这些siRNA能够特异性地结合目标mRNA并诱导其降解，从而减少目标基因的表达水平。    

第三代慢病毒包装系统。第三代包装系统：

1. 包装质粒pMDLg/pRRE表达 gag （Group-specific Antigen，编码核心结构蛋白，包括基质蛋白（MA）、衣壳蛋白（CA）和核衣壳蛋白（NC）。）和 pol（Polymerase，编码病毒复制所需的酶类，包括逆转录酶（RT）、整合酶（IN）和蛋白酶（PR）。），

2. pRSV-Rev包装质粒表达 rev（Regulator of Virion，编码一种调节蛋白，控制病毒RNA的核输出和翻译。）。

3. 包膜质粒：VSV-G。

4. 载体质粒（Transfer Plasmid）：该质粒包含目标shRNA序列（或其他RNA干扰分子，如siRNA）的表达盒，通常在U6或H1启动子的控制下。载体质粒还包含其他必要的元件，如选择标记（如抗生素抗性基因）和荧光标记（如GFP或RFP），以便于筛选和监测转染效率。 

   
   

定制服务

点突变细胞稳转株构建

基因敲除细胞稳转株构建（移码突变）

基因敲除细胞稳转株构建（缺失突变）

基因敲低细胞稳转株构建

基因敲入细胞稳转株

Tet诱导基因表达细胞稳转株构建

质粒基因递送的脂质纳米颗粒（LNP）

shRNA基因敲低稳转株构建

文库质粒克隆（包括oligo合成和NGS验证）

CRISPR文库质粒构建

shRNA文库构建

Barcode文库构建

增强子/启动子文库构建

突变文库构建

全基因组CRISPRa文库

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。如有侵权，可联系我们删除