Crispr/Cas9系统实现基因编辑/敲除/敲入，操作步骤

Crispr/Cas9操作步骤由于Crispr/Cas9系统应用广泛，可以实现基因编辑，完成基因的敲除/敲入，还可以进行基因表达调控和剪辑替换。因此我们对Crispr Cas9系统展开讲述具体的操作方法（后台回复 Crispr 可获得基因编辑技术资料）。

1.确定目的基因及序列：NCBI、Ensembl、DDBJ，可获取序列

2.基因组靶点的重要特征包括：长度大约为20个核苷酸；序列带有PAM序列。

3.设计gRNA：不包含PAM序列；可以是基因组DNA的任一条链；对于基因组破坏，gRNA靶定的位点应靠近蛋白编码区的N端，以便增加基因破坏的可能性。

.sgRNA的设计要求：

应用CRISPR/Cas9技术敲除多个靶基因

利用CRISPR/Cas9技术构建敲除MEIS2基因的HEK293T人胚肾细胞系

利用CRISPR/CAS9技术编辑水稻香味基因Badh2

基于CRISPR/Cas9技术的水稻千粒重基因tgw6突变体的创建

基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除

全新DNA编辑工具——CRISPR-Cas9技术

使用CRISPR/Cas9技术和TALEN技术敲除斑马鱼特定基因片段

利用CRISPR/Cas9技术构建定点突变小鼠品系

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。如有侵权，可联系我们删除