粒曼点突变细胞系构建服务原理

点突变是指利用CRISPR/Cas9或其他基因编辑技术，在特定位点引入单一核苷酸突变，包括碱基替换、插入或缺失等，点突变细胞可用于基因功能研究、疾病机制研究、药物研发及进化研究。

粒曼点突变细胞系构建服务原理  

 构建细胞点突变模型的理论基础是基因的同源重组修复。当基因组DNA双链由于外部因素而断裂时，细胞中存在的DNA修复机制就会被激发，对断裂位点的DNA双链进行修复，根据修复方式的不同可分为同源重组修复（Homologous directed repair,HR）和非同源重组修复（Non-homologous end join, NHEJ）。同源重组修复（HR）是指DNA在修复的过程中以同源的DNA序列作为模板进行完美修复。非同源重组修复（NHEJ）是指细胞内的相关蛋白直接将断裂的DNA两端重新连起来，可能会随机引入或缺失一定数量的碱基。利用相应的方法可以促进细胞的同源重组修复的同时引入带有含有指定突变的供体DNA，可以完成对目标DNA的定点编辑。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

点突变细胞系构建服务优势

①技术优势：对于上述方法构建的点突变细胞，没有引入任何额外的报告或抗性基因，可以最大限度保持对基因组非编辑位点的影响。

②方案设计：10年以上海外专研基因编辑团队，精心优化设计点突变方案，全方位考虑sgRNA切割PAM区域、切割特异性，donor序列的位置长度及修饰、测序验证引物的结合位点等多个细节。

③转染优势：粒曼生物3000+细胞成功编辑经验，保证转染效率的基础上，可很大程度的提高点突变成功率。

④单克隆筛选：粒曼生物已实现自动化单克隆铺板及挑选，通过高效的单克隆测序，大幅提高编辑成功率。

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。如有侵权，可联系我们删除