RNA干扰实现基因敲减，技术详情

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。基因沉默，主要有转录前水平的基因沉默(TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)两类：TGS是指由于DNA修饰或染色体异染色质化等原因使基因不能正常转录；PTGS是启动了细胞质内靶mRNA序列特异性的降解机制。有时转基因会同时导致TGS和PTGS。

RNA干扰即用小片段的RNA把RISC（RNA沉默复合体）来对基因进行沉默，在这个方法的基础上衍生出了“shRNA”和慢病毒敲减等等的方法。RNA干涉（RNAi）在实验室中是一种强大的实验工具，利用具有同源性的双链RNA（dsRNA）诱导序列特异的目标基因的沉寂，迅速阻断基因活性。但敲减效率也往往是RNAi的一个软肋。

基因沉寂（Gene Silencing）也可以被称为“基因沉默”。基因沉寂是真核生物细胞基因表达调节的一种重要手段。指的是真核生物中由双链RNA诱导的识别和清除细胞非正常RNA的一种机制。以前，“基因沉寂”被理解为是真核生物染色体形成异染色质（Heterochromatin）的过程。最近的研究表明，“基因沉寂” 与“异染色质” 存在差异，尽管被沉寂的基因区段也呈高浓缩状态，但“基因沉寂” 所形成的染色体构象并不完全等同于"异染色质“构象。除此之外，两者还存在着基因表达调控程度上的差异，一般认为处于"基因沉寂“ 的染色质区的基因表达被”彻底“关闭，而”异染色质“ 状态的基因可能依然进行低水平的表达（转录）。

转录后基因沉默(PTGS)是近10年发现的一种生物(特别是真核生物)细胞抵抗外来核酸入侵及保持生物自身基因组完整性的防御机制,特别是与生物的病毒抗性密切相关.PTGS最初在植物内发现,近几年又分别在真菌、动物等生物细胞内发现。

定制服务：

敲低因表达的shRNA、慢病毒载体构建

shRNA慢病毒质粒的构建

shRNA敲减慢病毒

shRNA敲减细胞株

Cas9过表达稳转细胞株

Six2基因shRNA敲减慢病毒表达载体

小鼠硒蛋白基因shRNA敲减慢病毒重组载体

构建tead4敲减慢病毒载体

构建四环素诱导的YAP1敲减的病毒质粒

慢病毒介导ASRGL1 shRNA

稳定敲低Notch3基因H1299细胞系

利用短发夹核糖核酸(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒构建基因敲减质粒(VARS-sh组)

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。如有侵权，可联系我们删除