抗体-HRP标记辣根过氧化物酶,合成步骤化
发布时间:2025-02-26     作者:axc   分享到:
抗体-HRP标记辣根过氧化物酶,合成步骤
活化 HRP
采用戊二醛法:将 HRP 溶解于 0.1M 磷酸盐缓冲液(pH 6.8),加入戊二醛(终浓度 0.1-1%),室温搅拌 1 小时,形成 HRP - 戊二醛中间体。
或使用马来酰亚胺法:通过 SMCC(琥珀酰亚胺 - 4-(N - 马来酰亚胺甲基) 环己烷 - 1 - 羧酸酯)活化 HRP 的氨基,生成 HRP-SMCC 偶联物。
抗体交联
将抗体与活化的 HRP 混合,调节 pH 至 7.0-8.5(戊二醛法需控制 pH 9.0),室温反应 2-4 小时。
马来酰亚胺法需预先用 DTT 还原抗体的二硫键,再与 HRP-SMCC 反应,形成稳定的硫醚键。
终止反应与纯化
加入甘氨酸(终浓度 0.1M)淬灭未反应的戊二醛或 SMCC。
通过凝胶过滤(如 Sephadex G-200)或超滤去除未偶联的 HRP 和抗体碎片。
名称:抗体-HRP标记辣根过氧化物酶
纯度:95%+
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家 :齐岳生物
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状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
以上产品来源于齐岳生物axcAXC.2025.02.25