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产品名称:FITC-PEOz-NHS,异硫氰酸荧光素-聚(2-乙基-2-噁唑啉)-N-羟基琥珀酰亚胺酯
1. 化学结构与组成
双功能化结构:
由荧光标记基团异硫氰酸荧光素(FITC)、抗污亲水链聚(2-乙基-2-噁唑啉)(PEOz)和活性酯基团N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)组成,典型结构为 FITC-PEOz-NHS。
连接方式:
FITC端:通过异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与PEOz链的氨基或羟基反应,形成硫脲键或氨基甲酸酯键。
NHS端:通过PEOz链末端的羧酸基团(-COOH)与NHS活化(如使用EDC/NHS偶联反应),形成NHS酯。
2. 物理与化学性质
两亲性与反应活性:
PEOz链赋予材料水溶性、抗蛋白吸附性和生物相容性。
FITC提供强荧光信号(激发/发射波长:495 nm/525 nm),适用于荧光标记和成像。
NHS酯可与蛋白质的氨基(如赖氨酸侧链)高效反应,形成稳定酰胺键。
稳定性:
FITC在酸性或光照条件下易淬灭,需避光低温保存。
NHS酯在水中易水解,需干燥环境或现用现配。
3. 合成方法
多步偶联策略:
PEOz合成:通过阳离子开环聚合(CROP)合成末端含羟基的PEOz-OH。
羧酸化修饰:将PEOz-OH末端羟基氧化为羧酸(-COOH),如使用琼斯氧化法。
NHS活化:通过EDC/NHS偶联反应,将羧酸转化为NHS酯,得到PEOz-NHS。
FITC标记:
方法1:若PEOz链含氨基(如使用氨基引发剂),直接通过FITC的异硫氰酸酯与氨基反应。
方法2:若PEOz链无氨基,需先通过氨基化反应(如与乙二胺反应)引入氨基,再偶联FITC。
一锅法合成:
使用双官能团引发剂(如含羧酸和氨基的引发剂),通过CROP聚合直接得到PEOz-NHS和PEOz-NH₂,再分别偶联FITC。
4. 应用领域
蛋白质/抗体标记:
NHS酯与蛋白质的氨基反应,FITC提供荧光信号,PEOz减少非特异性吸附,实现高效荧光标记。
示例:标记抗体用于免疫荧光染色或流式细胞术。
药物载体修饰:
将FITC-PEOz-NHS偶联至纳米粒表面,实现荧光示踪与靶向分子(如抗体)的双重修饰。
示例:追踪脂质体在体内的分布。
生物传感器构建:
NHS酯固定酶或受体至传感器表面,FITC作为信号报告基团,PEOz降低背景干扰。
示例:检测葡萄糖或肿瘤标志物的荧光生物传感器。
细胞成像:
标记细胞膜蛋白或细胞器,研究细胞摄取机制或亚细胞定位。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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