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FITC-PEOz-MAL,荧光素异硫氰酸酯-聚(2-乙基-2-噁唑啉)-马来酰亚胺
发布时间:2025-03-17     作者:wyh   分享到:

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产品名称:FITC-PEOz-MAL,荧光素异硫氰酸酯-聚(2-乙基-2-噁唑啉)-马来酰亚胺

1. 结构设计

FITC(荧光标记):

荧光素异硫氰酸酯(FITC),提供绿色荧光(λ_ex~495 nm,λ_em~525 nm),用于追踪、成像或定量分析。

PEOz(亲水间隔臂):

抗蛋白吸附的聚(2-乙基-2-噁唑啉),作为柔性链段隔离FITC与MAL,减少空间位阻和荧光淬灭。

MAL(巯基反应基团):

马来酰亚胺(MAL),通过迈克尔加成与巯基(-SH)高效反应(速率常数~10³ M⁻¹s⁻¹),用于偶联含巯基生物分子(如抗体、蛋白、肽)。

2. 合成策略

双端修饰法:

步骤1:通过阳离子开环聚合合成PEOz-NH₂(如使用氨基引发剂)。

步骤2:将FITC的异硫氰酸酯基团与部分氨基反应(pH 8-9,避光),形成FITC-PEOz-NH₂。

步骤3:剩余氨基与马来酰亚胺丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(BMPS)反应,引入MAL基团。

保护-脱保护法:

步骤1:合成PEOz-N₃(通过叠氮化钠取代PEOz-OTs)。

步骤2:通过点击化学(如CuAAC)选择性修饰一端为FITC。

步骤3:还原另一端叠氮基为氨基,再偶联MAL。

3. 关键性质

光学性能:

FITC荧光强度受PEOz链长影响(短链保留亮度,长链可能淬灭)。

反应活性:

MAL在生理条件下(pH 7.4)稳定,与巯基偶联效率高(>95%)。

抗污性:

PEOz链屏蔽FITC和MAL,减少非特异性蛋白吸附。

生物相容性:

PEOz通过FDA认证,FITC和MAL常用生物标记试剂。

4. 表征与优化方向

结构验证:

NMR:确认PEOz链长、FITC/MAL接枝率及位置。

UV-Vis:定量FITC标记密度(λ_abs~495 nm)。

HPLC:分析MAL修饰效率(通过巯基反应前后峰面积变化)。

性能评估:

荧光量子产率:比较自由FITC与FITC-PEOz-MAL的亮度。

偶联效率:通过Ellman试剂检测剩余巯基,计算MAL反应率。

血清稳定性:验证PEOz抗污性对荧光信号的维持作用。

挑战与优化:

链长调控:平衡PEOz亲水性与FITC荧光强度(推荐DP=20-50)。

正交修饰:确保FITC和MAL分别修饰在PEOz两端(需保护-脱保护策略)。

储存条件:避光低温保存,防止FITC光漂白。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

FITC-PEOz-MAL,荧光素异硫氰酸酯-聚(2-乙基-2-噁唑啉)-马来酰亚胺

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