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FITC-PEOz-Biotin;异硫氰酸荧光素-聚(2-乙基-2-噁唑啉)-生物素
发布时间:2025-03-17     作者:wyh   分享到:

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产品名称:FITC-PEOz-Biotin;异硫氰酸荧光素-聚(2-乙基-2-噁唑啉)-生物素

1. 化学结构与组成

三功能化结构:

由荧光标记基团(FITC)、抗污亲水链(PEOz)和生物素(Biotin)组成,典型结构为 FITC-PEOz-Biotin。

FITC端:通过异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与PEOz链的氨基或羟基反应,形成硫脲键或氨基甲酸酯键。

Biotin端:通过PEOz链末端的羧酸(-COOH)或氨基(-NH₂)与生物素的氨基或羧酸偶联(如使用EDC/NHS或活性酯法)。

PEOz链:作为亲水抗污间隔臂,减少非特异性吸附,提高生物利用度。

2. 物理与化学性质

功能协同性:

FITC:提供强荧光信号(激发/发射波长:495 nm/525 nm),适用于成像和定量分析。

PEOz:赋予水溶性、抗蛋白吸附性和生物相容性,延长体内循环时间。

Biotin:与链霉亲和素(SA)或抗生物素蛋白(Avidin)结合常数极高(Kd ~ fM级),用于信号放大或靶向捕获。

稳定性:

FITC在酸性或光照条件下易淬灭,需避光低温保存。

Biotin在极端pH或高温下可能失活,需优化储存条件(pH 6-8,4℃)。

3. 合成方法

分步偶联策略:

PEOz合成:通过阳离子开环聚合(CROP)合成末端含羟基或氨基的PEOz。

双端功能化:

方法1(羟基末端):

将PEOz-OH末端氧化为羧酸(-COOH),通过EDC/NHS偶联Biotin-NH₂,得到PEOz-Biotin。

剩余羟基通过氨基化反应(如与乙二胺反应)引入氨基,再偶联FITC。

方法2(氨基末端):

直接使用含氨基的CROP引发剂,聚合得到PEOz-NH₂。

氨基分别与FITC的异硫氰酸酯和Biotin的活性酯反应,需注意反应顺序(先偶联FITC或Biotin)。

正交保护策略:

使用保护基团(如Fmoc保护氨基)选择性偶联FITC或Biotin,避免交叉反应。

4. 应用领域

生物传感器:

Biotin端固定至传感器表面(如SPR芯片),FITC作为信号报告基团,PEOz降低非特异性吸附。

示例:检测肿瘤标志物(如PSA)的夹心型荧光传感器。

靶向成像:

偶联至纳米粒或抗体表面,Biotin靶向特定受体(如肿瘤血管),FITC提供荧光信号。

示例:活体成像中追踪纳米药物在肿瘤部位的富集。

流式细胞术:

标记抗体或细胞表面蛋白,Biotin-SA系统放大信号,PEOz减少细胞非特异性粘附。

示例:稀有循环肿瘤细胞(CTC)的高灵敏检测。

药物递送:

修饰脂质体或聚合物胶束,Biotin介导主动靶向,FITC示踪递送过程,PEOz延长循环时间。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

FITC-PEOz-Biotin;异硫氰酸荧光素-聚(2-乙基-2-噁唑啉)-生物素

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