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产品名称：CY5.5-MAL；CY5.5标记的马来酰亚胺，CY5.5-maleimide

1. 结构解析

Cy5（或Cy5.5）：

远红光/近红外（NIR）荧光染料，典型光谱：

Ex/Em≈645/670 nm（Cy5），量子产率（Φ≈0.25）。

若为Cy5.5，可能发射波长微调至~680 nm，需具体确认。

MAL（马来酰亚胺）：

活性基团，与巯基（-SH）发生迈克尔加成（pH 6.5-7.5），形成稳定硫醚键（反应速率常数k≈10³ M⁻¹s⁻¹）。

典型结构：

Cy5通过氨基（-NH₂）与马来酰亚胺活化酯（如MAL-NHS）偶联，形成Cy5-MAL。

2. 合成策略

步骤：

Cy5活化：Cy5-NHS酯（商业可得）与马来酰亚胺乙胺反应，引入MAL基团。

纯化：HPLC分离未反应染料及副产物。

关键控制点：

反应pH需精确控制（pH 7.5-8.5）。

避免长时间暴露于强光（Cy5光敏）。

马来酰亚胺需现用现配（水解半衰期<1h）。

3. 物理化学性质

光谱特性：

消光系数（ε≈250,000 M⁻¹cm⁻¹），适合低浓度检测。

光稳定性：连续激发下荧光衰减<15%（1h内）。

反应活性：

与巯基反应效率>95%（过量试剂）。

竞争反应：需避免含巯基试剂（如DTT、谷胱甘肽）。

稳定性：

水解敏感性：MAL在碱性条件下易水解（需缓冲至pH 6.5-7.0）。

4. 典型应用

蛋白质标记：

标记抗体/酶：Cy5-MAL与IgG的铰链区巯基反应（37℃孵育30min）。

定量检测：标记后蛋白通过荧光光谱或流式细胞术分析。

细胞成像：

追踪细胞膜蛋白：标记后观察受体内化路径。

活细胞成像：低细胞毒性（需验证）。

药物递送：

脂质体/纳米粒表面标记：监控体内分布。

靶向配体偶联：通过巯基化PEG链接Cy5-MAL。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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