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产品名称:CY5.5-OPSS ,CY5.5-巯基吡啶
1. 结构与设计
Cy5.5:
远红光/NIR荧光染料,典型光谱:
Ex/Em≈675/695 nm(具体依供应商调整),量子产率(Φ≈0.15-0.25)。
相比Cy5(~670 nm),Cy5.5波长更长,组织穿透更深。
OPSS(正交保护的巯基):
结构为 Orthopyridyl Disulfide,通过二硫键保护巯基,在还原条件下(如谷胱甘肽环境)释放活性巯基,与蛋白质半胱氨酸残基形成二硫键。
典型结构:
Cy5.5通过柔性连接臂(如PEG链)与OPSS相连,确保反应活性与稳定性平衡。
2. 合成策略
步骤:
Cy5.5活化:将Cy5.5-NHS酯与含巯基的胺(如半胱氨酸衍生物)反应,引入巯基。
OPSS保护:通过二硫键交换反应,将巯基转化为OPSS基团。
纯化:HPLC分离未反应染料及副产物。
关键控制点:
OPSS需干燥避光保存(防氧化分解)。
反应pH(7.5-8.5)避免巯基质子化。
3. 物理化学性质
光谱特性:
消光系数(ε≈150,000-250,000 M⁻¹cm⁻¹),适合低浓度检测。
光稳定性:连续激发下荧光衰减<15%(1h内)。
反应活性:
OPSS裂解条件:谷胱甘肽(GSH,浓度>1 mM)或TCEP(pH 7.0)。
二硫键形成速率:k≈10² M⁻¹s⁻¹(依赖蛋白质巯基可及性)。
稳定性:
OPSS在生理条件下稳定(无还原剂时)。
标记后二硫键耐氧化(需验证具体条件)。
4. 典型应用
蛋白质标记:
抗体/蛋白定向标记:OPSS与半胱氨酸残基反应,减少随机标记背景。
流式细胞术:标记细胞膜蛋白,分析表达量。
活体成像:
肿瘤靶向:标记纳米粒,通过EPR效应富集后,OPSS与肿瘤微环境GSH反应释放荧光。
手术导航:NIR荧光实时显示肿瘤边界。
药物递送:
脂质体修饰:Cy5.5-OPSS插入脂质双层,追踪递送效率。
响应性释放:GSH触发药物与载体分离。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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