化学结构与性质
TRITC-Con A是一种将罗丹明(Tetramethyl Rhodamine Isocyanate,TRITC)与伴刀豆球蛋白A(Con A)结合的荧光标记蛋白。TRITC是一种常用的红色荧光染料,其吸收波长约为550 nm,发射波长约为570 nm,广泛用于荧光显微镜成像和流式细胞术。Con A是一种从伴刀豆中提取的糖结合蛋白,能够特异性识别和结合α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖等糖基团,常用于细胞表面糖链的标记和检测。结合了TRITC的Con A不仅保留了其糖结合特性,还增加了荧光标记功能,使其在生物成像中具有独特的优势。
合成方法
TRITC-Con A的合成通常通过将TRITC与Con A进行化学偶联实现。TRITC具有活性的异氰酸酯基团(-NCO),能够与蛋白质中的氨基(-NH2)发生反应,形成稳定的共价键。具体步骤如下:
溶解TRITC:将TRITC溶解在适当的有机溶剂(如二甲基亚砜,DMSO)中。
混合反应:将溶解后的TRITC与Con A混合,在温和的条件下(如室温、pH 7.4的缓冲溶液)进行反应。
纯化:反应完成后,通过透析或凝胶过滤等方法去除未反应的TRITC,得到纯化的TRITC-Con A。
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