能否提供DSPE-PEG2000-N3的具体合成步骤?
DSPE-PEG2000-N3 的合成需通过多步有机反应实现,结合以下步骤完成:
一、DSPE-PEG2000 前体制备
原料准备
DSPE(二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)
PEG2000(聚乙二醇,分子量 2000)的活性衍生物(如 PEG2000-羧酸、PEG2000-NHS 酯等)
酯化反应
将 DSPE 溶解于无水二氯甲烷或 DMSO 中,加入 PEG2000-羧酸(或 PEG2000-NHS 酯);
加入催化剂(如 DCC/DMAP 或 EDC/NHS),在氮气保护下室温反应 12–24 小时;
通过旋转蒸发去除溶剂,透析(MWCO 3500)或凝胶色谱(如 Sephadex G-25)纯化,得到 DSPE-PEG2000
二、氨基中间体制备(DSPE-PEG2000-NH₂)
羟基活化(若 PEG 末端为羟基)
将 DSPE-PEG2000 溶于无水 DMF,加入对甲苯磺酰氯(TsCl)和三乙胺,冰浴反应 2–4 小时,活化 PEG 末端羟基为甲苯磺酸酯(PEG-Ts)
氨基取代
在 PEG-Ts 溶液中加入过量乙二胺或叠氮化钠(NaN₃),升温至 40–60°C 反应 6–12 小时;
透析去除未反应胺类试剂,冷冻干燥得到 DSPE-PEG2000-NH₂
三、叠氮基团引入(DSPE-PEG2000-N3)
叠氮化反应
将 DSPE-PEG2000-NH₂ 溶于无水 DMF/DMSO;
加入叠氮活性酯(如 N3-NHS 或磺酰叠氮试剂),并加入催化剂量三乙胺;
避光条件下室温搅拌 4–6 小时,完成氨基与叠氮基的酰胺键偶联
终止与纯化
加入冰乙醚沉淀产物,离心收集沉淀;
透析(MWCO 3500)48 小时去除未反应叠氮试剂;
冷冻干燥后通过凝胶色谱进一步纯化
四、表征与验证
核磁共振氢谱(¹H NMR)
检测 δ 3.3–3.7 ppm 处 PEG 链特征峰及 δ 1.2–1.3 ppm 处 DSPE 的硬脂酸链峰;
叠氮基团特征峰需通过红外光谱(FTIR)在 2100 cm⁻¹ 附近确认
质谱分析
使用 MALDI-TOF 质谱检测分子量是否匹配理论值(DSPE-PEG2000 ≈ 2800 Da + N3 基团质量)
关键参数与注意事项
溶剂选择:叠氮化反应需严格无水(DMF/DMSO 需分子筛干燥);
避光操作:叠氮基团对光敏感,全程需避光处理;
叠氮试剂比例:叠氮活性酯需过量 3–5 倍以确保反应完全
合成路线总结
DSPE → DSPE-PEG2000 → DSPE-PEG2000-NH₂ → DSPE-PEG2000-N3
通过分步酯化、氨基化及叠氮功能化,最终产物可用于靶向纳米载体的点击化学修饰。
关于我们:
西安齐岳生物提供多种聚乙二醇(PEG)相关产品,其中PEG衍生物系列丰富,涵盖不同分子量与活性基团修饰类型。例如,公司可提供含羧基(-COOH)、氨基(-NH₂)、马来酰亚胺(Mal)等功能化PEG,适配药物递送载体修饰需求;针对生物偶联场景,提供荧光标记PEG(如FITC/Cy染料修饰)及靶向分子(如叶酸-PEG)以增强载体靶向性;同时供应PEG-磷脂复合物(如DSPE-PEG)用于脂质体制备,以及可生物降解的PEG嵌段共聚物(如PLGA-PEG、PCL-PEG)以实现药物缓释。所有产品均经过严格纯化(纯度≥95%),支持定制化分子量与官能团组合,并提供配套表征服务,满足科研及工业级应用需求。
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