cas:2353409-48-8，TCO-PEG2-Sulfo-NHS ester的反应机制

名称：TCO-PEG2-Sulfo-NHS ester

纯度：95%+

反应机制

TCO-PEG2-Sulfo-NHS ester 是一种用于生物偶联的双功能试剂，其反应机制基于反式环辛烯（TCO）与四嗪（Tetrazine）的生物正交反应，以及 NHS 酯的亲电取代反应：

双功能基团设计：

TCO 基团：反式环辛烯，含不饱和双键，与四嗪（如 sTetrazine）发生Diels-Alder 反应，形成稳定的六元环产物。该反应具有以下特点：

无铜催化：适用于活体环境，避免金属离子；

快速动力学：反应速率常数 k≈10⁴-10⁵ M⁻¹s⁻¹，远快于传统点击反应（如叠氮 - 炔烃）；

生物正交性：不干扰生物体内官能团（如羟基、氨基）。

Sulfo-NHS 酯基团：磺酸化 N - 羟基琥珀酰亚胺酯，在弱碱性条件（pH 7.5-9.0）下与氨基（-NH₂）反应，形成酰胺键，释放 NHS 副产物。Sulfo - 基团增加水溶性，适用于水性偶联体系。

反应分步机制：

步：NHS 酯的氨基偶联：

亲核取代反应：氨基进攻 NHS 酯的羰基碳，形成四面体中间体，随后 NHS 离去，生成酰胺键。

条件：pH 8.0-8.5（促进氨基去质子化），常用缓冲液为 HEPES 或 PBS，反应时间 30 分钟至 2 小时。

二步：TCO - 四嗪点击反应：

环加成反应：TCO 与四嗪通过逆电子需求的 Diels-Alder 反应，生成稳定的哒嗪衍生物，无需催化剂，在水相中快速完成（数分钟至 1 小时）。

应用场景与优化：

蛋白质标记：通过 Sulfo-NHS 酯偶联抗体或蛋白的赖氨酸氨基，再与含四嗪的荧光探针或药物分子反应，实现定点标记。

活体成像：利用 TCO - 四嗪反应的快速性，可对小鼠体内的 biomolecules 进行实时成像（如肿瘤血管标记）。

优化要点：Sulfo-NHS 酯在酸性条件下易水解，需控制反应 pH；TCO 基团在高温下可能异构化，需低温保存（-20℃）。

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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