cas:2353409-61-5,N-Desthiobiotin-N-bis(PEG4-NHS ester)的反应原理
名称:N-Desthiobiotin-N-bis(PEG4-NHS ester)
纯度:95%+
N-Desthiobiotin-N-bis(PEG4-NHS ester)是一种可切割的生物素化试剂,结构包含:
去硫生物素(N-Desthiobiotin):保留与亲和素的结合能力,但可通过温和的还原剂(如 DTT)断裂硫醚键,实现生物素的可逆连接;
双 PEG4-NHS 酯:两端的 NHS 酯可与生物分子的氨基反应,形成酰胺键,PEG4 间隔臂增加水溶性和柔性。
反应原理:
生物素化阶段:
在 pH 7.5-8.5 的缓冲液中,NHS 酯与生物分子(如蛋白质、肽)的赖氨酸 ε- 氨基发生亲核取代反应,释放 NHS,形成稳定的酰胺键,实现生物素基团的共价偶联。
反应通常在室温下进行 1-2 小时,NHS 酯与氨基的摩尔比为 5:1 至 10:1,以确保标记效率。
可逆切割阶段:
当需要去除生物素或释放靶分子时,加入 DTT(10-50 mM)等还原剂,断裂去硫生物素中的硫醚键(-S-S-),生成巯基化合物和生物素衍生物,反应时间 30 分钟至 1 小时。
优势:
避免传统生物素 - 亲和素系统的不可逆结合,适用于需要动态调控的场景(如蛋白质纯化后释放、细胞表面标记的可逆去除);
PEG4 间隔臂减少空间位阻,提升标记分子的水溶性;
双官能团设计支持交联两个氨基化分子,用于蛋白质 - 蛋白质相互作用研究。
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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