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FITC-Human IgA,异硫氰酸荧光素(FITC)标记重组人IgA的合成步骤概述
发布时间:2025-05-22     作者:axc   分享到:

FITC-Human IgA,异硫氰酸荧光素(FITC)标记重组人IgA的合成步骤概述

FITC通过异硫氰酸酯基团与IgA抗体的赖氨酸残基ε-氨基共价结合,实现荧光标记,用于免疫荧光检测、流式细胞术或细胞成像。

合成步骤概述:

缓冲液置换:

将重组人IgA溶于碳酸盐缓冲液(pH9.0-9.5),去除含氨基的缓冲剂(如Tris),避免竞争反应。

FITC溶解与添加:

FITC溶于DMSO制成高浓度溶液,缓慢滴入IgA溶液中,避光搅拌反应2-4小时(室温或4℃)。

反应式:FITC-N=C=S+H₂N-IgA→IgA-NH-CO-S-FITC

终止反应:

加入Tris-HCl缓冲液(pH8.0)封闭未反应的FITC。

纯化:

透析:用PBS透析去除游离FITC(分子量截止值10kDa)。

凝胶过滤层析:如SephadexG-25柱,分离标记与未标记的IgA。

质量控制:

荧光光谱:测定激发(~495nm)和发射(~520nm)强度,计算标记效率(F/P比值)。

SDS-PAGE:检测蛋白完整性,避免降解或聚集。

名称:FITC-Human IgA,异硫氰酸荧光素(FITC)标记重组人IgA

纯度:95%+

性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。

溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

FITC-Human IgA

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