尼罗蓝荧光染料是什么？Nile Blue尼罗蓝荧光激发波长是多少？

尼罗蓝（Nile Blue）是一种传统的有机荧光染料，具有良好的荧光特性和亲脂性，常用于细胞成像、生物膜染色、线粒体标记以及荧光探针的开发。它与结构类似的染料“尼罗红（Nile Red）”有相似用途，但在某些应用中显示出更强的荧光或更稳定的性能。

基本信息

中文名称：尼罗蓝

英文名称：Nile Blue A、Nile Blue sulfate

分子式：C₂₀H₂₀ClN₃O

分子量：349.85 g/mol

CAS号：3625-57-8

激发波长（Ex）：约 635–640 nm

发射波长（Em）：约 660–680 nm

荧光颜色：红色或近红外

溶解性：可溶于水、乙醇、DMSO等*性溶剂

应用领域

1.细胞成像

尼罗蓝可用于染色细胞质、线粒体或脂质结构，适用于荧光显微镜。

具有较高的荧光穿透能力，适合厚组织成像或共聚焦扫描。

2.膜染色

亲脂性使其能插入磷脂双层，用于脂质膜染色和细胞膜示踪。

在*性环境中荧光较弱，在疏水环境中增强，适合作为膜*性探针。

3.线粒体染色

可被线粒体摄取并积聚，部分实验中作为线粒体选择性荧光染料使用。

4.DNA染色（较少用）

与DNA结合后可显示一定荧光增强，但不如Hoechst或PI敏感。

5.生物传感

用于开发荧光探针，如检测pH、*性、脂质含量等的智能染料。

优点

激发/发射波长远离绿色光区，适用于多重染色实验

良好的亲脂性，可标记细胞膜或疏水结构

荧光较稳定，适用于共聚焦成像和较长时间观察

缺点与注意事项

与尼罗红对比

常规染色方法（简略版）

配制染色液（如：1–10 μM 尼罗蓝溶液于PBS或DMSO稀释液中）

细胞用PBS清洗两遍，去除培养基

加入染色液，37°C孵育15–30分钟（避光）

用PBS冲洗2–3次，移入成像缓冲液

使用荧光显微镜（Cy5或近红外通道）观察

总结

尼罗蓝是一种实用的红色荧光染料，适用于多种生物成像用途，特别是在脂质膜、线粒体和组织成像中表现良好。其远红区荧光特性也适用于多染色实验及组织穿透成像。