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FITC-arachidonic acid,FITC-花生四烯酸绿色荧光标记的脂类信号分子探针
发布时间:2025-05-27     作者:ssl   分享到:

FITC-arachidonic acid,FITC-花生四烯酸绿色荧光标记的脂类信号分子探针

FITC-花生四烯酸(FITC-arachidonic acid)产品介绍

一、产品概述

FITC-花生四烯酸是一种将荧光素异硫氰酸酯(FITC)共价标记于花生四烯酸(Arachidonic Acid, AA)分子上的荧光探针化合物。这种标记方式赋予了花生四烯酸分子以绿色荧光特性,使其在细胞水平上的分布、转运、代谢研究中具有可视化和可量化的优势,广泛应用于脂质代谢、炎症反应机制、脂氧合酶/环氧合酶通路研究、膜脂相互作用以及信号传导过程的实时监控。

 

二、分子结构与理化性质

花生四烯酸(AA)基本信息:

化学名:5,8,11,14-二十碳四烯酸(20:4 ω-6)

分子式:C₂₀H₃₂O₂

分子量:304.5 Da

属于多不饱和脂肪酸,具有四个顺式双键,容易发生氧化反应。

FITC-arachidonic acid,FITC-花生四烯酸 

FITC基本信息:

荧光素异硫氰酸酯,常用于蛋白、肽类、小分子等的标记。

发射波长(Ex/Em):约495 / 520 nm,发出明亮绿色荧光。

具有异硫氰酸基团(–N=C=S),能与氨基发生共价反应形成稳定的硫脲键。

FITC-花生四烯酸的结合特性:

通常通过在AA分子上引入一个连接臂(如氨基修饰基团),然后与FITC反应得到标记产物。

所形成的共价键稳定,不影响AA本身的生物活性。

理化性质:

分子量增加至约700–800 Da(取决于连接臂结构)。

保留疏水性但溶解性略提升,可在DMSO、乙醇、或带Tween-20的缓冲液中使用。

荧光信号稳定,适合细胞水平或组织水平成像。

 

三、制备方法概述

步骤一:AA修饰

在花生四烯酸分子末端引入可反应的胺基(如通过与氨基丙胺缩合)或使用AA胺衍生物。

步骤二:FITC偶联

使用FITC在弱碱性缓冲液(如pH 8.0的碳酸盐缓冲液)中与AA衍生物反应,生成硫脲键连接的FITC-AA。

步骤三:纯化与鉴定

采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行纯化。

使用质谱(MS)和核磁共振(NMR)验证产品结构。

荧光光谱测定确认其发射波长及荧光效率。

 

四、生物学功能与作用机制

花生四烯酸的生理作用:

是细胞膜磷脂中关键的前炎性信号脂肪酸。

经环氧合酶(COX)、脂氧合酶(LOX)、P450等酶代谢生成前列腺素、白三烯等炎性介质。

调控免疫反应、血小板聚集、神经信号传导等多种生理功能。

FITC标记的优势:

赋予AA荧光可视化能力,可直接观察其在细胞内外的分布、摄取、转运。

通过荧光强度变化反映AA代谢活性或胞内浓度。

可用于与特定酶(如PLA₂, COX, LOX)的相互作用研究。

 

五、主要应用领域

脂质代谢研究:

研究AA在脂代谢通路中的转运、活化和酶促代谢行为。

追踪AA在细胞膜和胞质间的动态分布。

炎症与免疫研究:

用于检测AA参与炎症因子合成(如PGE₂、LTB₄)的过程。

研究炎症性细胞(如巨噬细胞、嗜酸性粒细胞)中AA的释放和代谢。

药物筛选与抑制剂评价:

评估环氧化酶、脂氧合酶、PLA₂等靶点抑制剂对AA代谢的影响。

用作脂类信号通路中小分子抑制剂的筛选工具。

细胞成像与流式细胞术:

可用于共聚焦显微镜下实时观察AA摄取和定位。

适合用于流式细胞术检测AA摄取情况和代谢状态。

膜动态与生物材料研究:

研究AA在人工膜系统或纳米材料中的吸附与释放行为。

用于构建脂质体、纳米胶束等载体系统的脂肪酸荧光探针。

 

六、储存与使用建议

储存条件:

避光、低温(–20℃以下)密封保存。

溶解后建议分装并避光保存于–80℃,避免反复冻融和氧化。

溶剂建议:

推荐使用无水DMSO、乙醇等有机溶剂稀释。

如用于细胞实验,可适当稀释入带Tween-20的PBS,防止沉淀。

使用注意事项:

避免长时间暴露于空气和强光,以防AA部分氧化或FITC光漂白。

实验中应设未标记AA对照组,以排除FITC本身干扰。

 

七、总结与展望

FITC-花生四烯酸是一类具有重要科研价值的荧光脂质探针。它融合了花生四烯酸在炎症信号、脂代谢、神经功能等领域的关键生物学作用,与FITC荧光分子所提供的高灵敏可视化能力。该产品为研究脂质信号通路、药物筛选、炎症机制、代谢动态提供了强有力的工具。

未来,结合FITC-AA与先进成像技术(如单分子追踪、超分辨显微镜)、脂质组学技术以及AI驱动的数据分析,将进一步提升脂质代谢机制研究的精度和深度,也为脂质类药物的开发与靶向输送带来新突破。


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