NHS-S-S-NHS,1688598-83-5,含有双硫键的二功能N-羟基琥珀酰亚胺酯交联剂的反应步骤
NHS-S-S-NHS是一种含有双硫键(disulfide bond)的二功能N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯交联剂,应用于生物分子标记和交联实验中,特别适用于可逆性蛋白质交联。其反应步骤主要基于NHS酯与蛋白质或其他含有游离氨基的生物分子的共价偶联,以及双硫键的可控断裂。
首先,在反应体系中,NHS-S-S-NHS的两个NHS酯端在适宜的碱性缓冲液(pH 7.0~8.5)中活化。NHS酯能够高效地与目标生物分子表面的自由氨基(-NH2)形成稳定的酰胺键。此阶段,分子两端的活性基团会分别与两个氨基团发生共价结合,完成交联过程。由于分子中心包含的双硫键,形成的交联体结构中存在一个可还原的断裂点。
交联完成后,双硫键部分可通过还原剂(如二硫苏糖醇DTT或β-巯基乙醇)特异性断裂,释放交联的两个蛋白质或分子,实现交联的可逆性调控。这一特性使得NHS-S-S-NHS成为研究蛋白质相互作用、构象变化及动态调控的重要工具。
整个反应步骤强调温和条件控制,避免蛋白质失活和非特异性反应。反应时间一般控制在30分钟至数小时,具体视标记分子浓度和反应环境而定。反应后通常需要通过凝胶过滤或透析去除游离试剂和副产物,保证标记产品的纯度。
综上,NHS-S-S-NHS的反应步骤依托NHS酯的高反应活性及双硫键的还原可逆性,为蛋白质及生物大分子的可控交联和标记提供了高效、灵活的化学手段。
英文名称: NHS-SS-NHS
中文名称: 活性酯-双硫键-活性酯,NHS-SS-NHS
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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