TRITC-ConA：应用于糖链结构成像与分析的红色荧光示踪剂

TRITC-ConA 产品信息介绍

一、产品概述

TRITC-ConA是以Concanavalin A（康纳林凝集素，简称ConA）为基础，通过四甲基罗丹明异硫氰酸酯（Tetramethylrhodamine isothiocyanate, TRITC）进行共价标记的荧光结合物。ConA是一种来源于刀豆（Canavalia ensiformis）的植物凝集素，具有特异识别α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基的能力，广泛应用于糖蛋白鉴定、细胞表面糖链分析及细胞成像研究。

TRITC标记使ConA获得明亮的橙红色荧光，极大地方便了其在荧光显微镜、流式细胞术及荧光探针等领域的应用。

二、ConA的生物学特性

ConA是一种四聚体的蛋白质，分子量约为26 kDa（单体约26 kDa，四聚体约104 kDa），对α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖有高度特异性结合能力。其糖结合特性使得ConA能与细胞表面或胞外基质的糖蛋白及多糖结合，成为研究细胞膜糖结构和细胞相互作用的重要工具。

在细胞生物学、免疫学和生物材料研究中，ConA可用于标记细胞表面糖链，监测糖基化变化，鉴定糖蛋白分布，及作为载体介导细胞摄取等。

三、TRITC标记原理及结构特点

TRITC是一种广泛使用的荧光染料，属于罗丹明类，具有良好的光稳定性和高量子产率。它的异硫氰酸基团可与蛋白质赖氨酸上的氨基形成稳定的共价键，实现荧光标记。

标记机理：TRITC通过异硫氰酸基团与ConA表面赖氨酸残基氨基共价结合，形成稳定的荧光结合物。

荧光性质：大激发波长约为540-550 nm，大发射波长约为570-590 nm，呈橙红色荧光。

分子结构：ConA保持其四聚体结构，TRITC标记位点主要分布在蛋白表面，标记后不显著影响糖结合活性。

四、产品制备与质量控制

制备方法

采用高纯度ConA蛋白作为起始物。

调节反应pH（一般为碳酸氢盐缓冲液pH 8.3-9.0）使氨基呈反应活性状态。

加入TRITC染料，在控制温度和时间下完成标记反应。

通过透析或凝胶过滤去除游离未反应的染料。

质量检测

SDS-PAGE分析蛋白完整性及纯度。

紫外-可见吸收光谱和荧光光谱检测荧光特性。

标记度测定，确保染料和蛋白比例适中。

糖结合活性验证，保证标记后ConA的功能性。

五、理化性质

外观：橙红色冻干粉末或溶液。

溶解性：易溶于水及缓冲液（如PBS、HEPES）。

稳定性：避光、低温保存，冻干状态可长期保存；溶液建议4℃避光短期保存。

pH适应范围：稳定于pH 6-8。

六、主要应用领域

细胞表面糖链标记

TRITC-ConA能特异结合细胞膜表面含有α-D-甘露糖或α-D-葡萄糖残基的糖蛋白，通过荧光显微镜直观显示细胞表面糖基化分布及变化，常用于细胞识别、分化、凋亡等研究。

糖蛋白和多糖分析

利用其糖特异结合性，TRITC-ConA用于糖蛋白纯化、定位及定量分析，适合研究细胞外基质成分及病理状态下糖基化异常。

流式细胞术

TRITC-ConA结合细胞表面糖分子，实现细胞群体糖基化特征分析，应用于肿瘤细胞分型、免疫细胞识别及干细胞表征。

细胞内吞和信号传导研究

通过TRITC-ConA的细胞摄取实验，可研究糖受体介导的内吞路径和细胞信号转导机制。

组织染色和病理学

用于组织切片的荧光染色，观察组织糖蛋白的分布，辅助肿瘤和代谢疾病病理分析。

纳米载体和药物递送

结合TRITC-ConA修饰的纳米材料实现靶向细胞表面糖受体，提高药物或基因递送效率。

七、使用方法及实验指导

溶解：建议用PBS或其他生理缓冲液溶解，浓度一般根据实验目的调整，常用范围为1-100 μg/mL。

孵育条件：室温或37℃孵育15-60分钟，具体时间根据细胞类型和实验需求调整。

洗涤：用PBS洗涤除去未结合探针，减少背景信号。

荧光检测：使用荧光显微镜（激发波长约540-550 nm，发射波长570-590 nm）或流式细胞仪进行检测。

对照设置：建议设置未染色对照和竞争结合对照（如加无标记ConA）以验证特异性。

八、注意事项

保存：避免光照及反复冻融，防止荧光淬灭及蛋白降解。

实验环境：pH过高或过低均可能影响ConA活性及标记荧光强度。

非特异结合：细胞表面可能存在非特异结合，应设立适当的封闭或洗涤步骤。

生物安全：严格按照生物安全规程操作，避免误吸入或皮肤接触。

适用范围：不同细胞系及组织糖基化水平不同，需结合具体实验调整用量及条件。

九、技术支持与定制服务

我们提供多规格TRITC-ConA产品，支持批量定制与功能化改良，包括其他荧光染料（如FITC、Alexa Fluor系列）标记、多价ConA及生物素标记等，满足不同科研和应用需求。配套的实验方案、数据分析及技术支持由资深专家团队提供，确保客户顺利开展实验。

十、总结

TRITC-ConA凭借其独特的糖识别功能和优异的橙红色荧光性能，成为细胞生物学、糖蛋白研究及分子成像领域的关键工具。其应用涵盖细胞膜糖基化检测、受体介导内吞机制研究、肿瘤和免疫学诊断等多个领域，助力科研人员深入揭示糖相关生物过程及疾病机制。

西安齐岳生物科技有限公司专注于高品质聚乙二醇（PEG）及其衍生物的研发与生产，提供涵盖线性PEG、支化PEG、多官能团PEG、嵌段共聚物PEG等在内的多种基础结构产品，广泛应用于生物医药、诊断试剂、纳米材料及化学合成等领域。公司具备灵活的定制能力，可根据客户需求提供特定分子量（200–20,000 Da）、官能团（如-NH₂、-COOH、-SH、-N₃、-Biotin、荧光标记等）以及不同结构的PEG修饰服务。凭借先进的合成平台与严格的质量控制体系，齐岳生物致力于为科研、药物开发和材料应用提供可靠、稳定、可追溯的PEG解决方案，支持客户实现从实验室研究到产业转化的各类需求。

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态：固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研，不能用于人体实验!

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